人参HMGR基因的克隆与序列分析-吉林农业大学学报.PDF

吉林农业大学学报 　2010 ,32 (5) :500～504 http :/ / x uebao. j lau . edu . cn J ournal of J ilin A gricultural University Email :j lndxb @vip . sina . com 人参 HM GR 基因的克隆与序列分析 郜玉钢, 杨 　鹤, 于 　英, 臧 　埔, 李王番瑛, 刘 　霞 , 张连学 吉林农业大学中药材学院 , 长春 130118 摘 　要 : 以人参根 RNA 为模板 ,根据其他植物 HMGR 基因序列保守区设计特异性简并引物 ,进行 RT - PCR 扩 增 。纯化回收 HMGR 基因 RT - PCR 产物与pMD18T 载体连接 ,再转化到JM109 大肠杆菌中进行克隆 ,对阳性 克隆菌重组质粒进行测序和序列分析 。结果表明:人参 HMGR 核心片段的大小为 458 bp ,与其他植物核苷酸 序列有较高的同源性 ,依次为杜仲 861 % 、南京椴 838 % 、长春花 832 % 、马铃薯 825 % 、苹果 821 % 、景烈白 兰 816 % 、肾叶橐吾 816 % 、南苍术 810 % 、红豆杉 804 % 、水稻 803 % 。 关键词 : 人参 ; 生物合成 ; HMGR ; 克隆 ( ) 中图分类号 : Q785 ; R2841 　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 2010 Cloning and Sequence Analysis of HM GR Gene in Ginseng GAO Yugang , YAN G He , YU Ying , ZAN G Pu , LI Fanying , LIU Xia , ZHAN G Lianxue College of Chinese Medicinal M aterials , J ilin A gricultural University , Changchun 130118 , China Ab stract : Using RNA from ginseng roots as templates , designing specific degenerate primers based on conserved HMGR gene from various plants , RT - PCR was performed . The products of RT - PCR were recovered , purified and cloned into pMD18T vector , then transformed into competent Escherichia coli JM109 . Inserts included in the plasmid were sequenced and analyzed . The results showed that the gene of HMGR was 458 bp , the nucleotide sequence showed high homology with other plants. The identities of nucleotide sequences were Cortex Eucommiae 86 . 1 % , Tilia miqueliana Maxim 838 % , Catharanthus roseus (L