GB/T 18086-2000植物检疫　烟霜霉病菌检疫鉴定方法.pdf

ca/T 18086-2000 前 言 烟霜霉病是我国进境植物检疫危险性病害，为了防止该病菌随寄主传人我国，在进境检疫时，需正 确掌握烟霜霉病菌的检疫鉴定方法 本标准在制定过程中，经过调查研究，分析有关资料和总结多年的实践经验，以及根据烟霜霉病菌 的生物学特性、病理学原理，确定各项技术指标。 本标准给出烟霜霉病病原菌的抱囊梗和抱囊及卵抱子的形态特征，两者可同时或单独作为烟霜霉 病菌的鉴定依据。 本标准的附录A是提示的附录，附录中的“冰冻匀浆法”是检验烟霜霉病菌卵抱子的一种较先进的 方法，但目前在国内尚未普及，故在检验烟霜霉病菌时，若条件允许，也可采用此法检验该病原产生的卵 抱子 本标准由农业部提出 本标准负责起草单位 :中华人民共和国广东出入境检验检疫局。 本标准主要起草人:李怡珍、章正、钟国强、张传飞。 中华人民共和 国国家标准 植物检疫 烟霜霉病菌检疫鉴定方法 cB/T 180862000 Plantquarantine-Methodsforinspectionandidentification ofPeronosporahyoscyamideBaryf.sp.tabacina(Adam)Skalichy 1 范围 本标准规定了进境植物检疫中对烟霜霉病菌的检疫鉴定方法 本标准适用于进境干烟叶和烟属植物种子、种苗的烟霜霉病菌检疫和鉴定。 2 原理 烟霜霉病菌为专性寄生菌，烟叶被侵染为害后，出现边缘模糊、褪绿的近圆形斑点，后期形成淡褐色 可脱落的坏死病斑。在适宜温湿度条件下，叶背面病斑长出淡蓝色霉状物，即烟霜霉病菌的抱囊梗和袍 囊;在一定条件下，病组织内可形成卵抱子。病原菌的寄生专化性及其形态学特征是鉴定烟霜霉病菌的 依据。 3 仪器、试剂 3.1手持扩大镜。 3.2 带光源的扩大镜。 3.3双目解剖镜(lox-50x). 3.4 显微镜(10OX一100OX)。 3.5 离心机(1000r/min-4000r/min). 3.6不锈钢筛(孔径60=[). 3.7振荡器(200r/min), 3.8 0.02mol/L磷酸缓冲液(pH=7)o 3.9 苯胺蓝。 3.10 乳酚油 乳酚油配制:苯酚结晶(水浴加热溶化))20mL、乳酸20mL、甘油40mL,蒸馏水20m工混合而成。 3.11 1o%氢氧化钾溶液 氢氧化钾溶液配制:取氢氧化钾10g，加水90mL溶解配成10%氢氧化钾溶液。 4 抽样 4门 抽查取样前查验待检烟叶的有关单证，核实产地、包装、啧头、品名、级别、收获年份及数量 42 用随机方法在货柜车、船舱、仓库堆位的上、中、下各层开件抽查，检查包内烟叶是否有可疑疫情 随机在包内的各个部位取样，注意抽取等级差、叶色暗淡无光泽的烟叶带回室内检验 4.3 抽查件数 国家质量技术监督局2000一04一26批准 2000一，0一01实施 cB/T18086-2000 按货物批量总件数0.5%一10%开件抽查取祥，500件以下的抽查20件，少于20件的全批抽查。其 余开件抽查件数如表工: 表 1 进境烟叶检疫抽杳表 批量25件数，件 抽查件数，件 500以 卜(含500了十) 501- 1000 21~ 30 1001- 3000 31- 40 3001- 5000 41^ 50 7001一 10000 51 70 10001以 I-