GB/T 19423-2003饲料中尼卡巴嗪的测定　高效液相色谱法.pdf

ICS 65.120 B 20 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T 19423-2003 饲料中尼卡巴嗓的测定 高效液相色谱法 Determinationofnicarbazininfeed- Highperformanceliquidchromatography 2003-12-11发布 U 八 卜 2004-06-01实施 徽 雷嘉矗矗赢森胃发“ GB/T19423- 2003 前 言 本标准检测方法主要以美国食品药物管理局(FDA)编著的《动物组织及饲料中兽药分析手册》一 书中“饲料中尼卡巴嚓的测定方法”为基础，经试验确定 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出。 本标准由全国饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准起草单位:浙江省饲料监察所。 本标准主要起草人:朱聪英、宣士荣、邵庆均、施杏芬、沈琴芳、张志健。 GB/T 19423-2003 饲料中尼卡巴嗓的测定 高效液相色谱法 范 围 本标准规定了用高效液相色谱仪测定饲料中尼卡巴嗦含量的方法。 本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中尼卡巴嗦的测定。 本方法的最低检测浓度为每千克饲料中尼卡巴嗦含量在 1mg以上。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本 凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准. GB/T 6682-1992 分析实验室用众规格和试验方洪 3 原理 用二甲基甲酞胺(DMF)提取试样中的尼卡巴嚷，经碱性氧化铝层析柱过柱纯化，浓缩并用洗脱液 溶解、定容，用高效液相色谱仪，C,:反相柱，以甲醇溶液为流动相，用紫外检测器在波长365nm条件下 进行定量测定。 4 仪器设备 4 . 1 高效液相色谱仪，配有紫外检测器。 4 2 色谱柱:C,:反相柱(粒度5um，柱长10cm，内径4.6mm). 4 3 旋转蒸发器。 4 4 电动振荡器。 4.5 层析管:1cmX30cm. 5 试剂和溶液 以下所用的试剂和水，除特别注明者外均为分析纯试剂，水为符合GB/T6682-1992中规定的三 级水 。 5.1 95%乙醇。 5.2 甲醇:色谱纯。 5.3 二甲基甲酞胺(DMF), 5.4 碱性氧化铝:100目一200目，105℃条件下烘2h后放干燥器中备用。 5.5 洗脱液:95%乙醇(5.1升甲醇(5.2)为95+5 5.6尼卡巴嚓贮备液:准确称取100mg尼卡巴嗦标准品，用DMF定容至100mL(浓度为1mg/mL). 5.7尼卡巴嚼工作液:移取1mL尼卡巴喷贮备液(5.6)，用DMF定量至100ml-(浓度为10ug/mL). 5.8 流动相:80十20的甲醇水溶液。 6 试样制备 选取有代表性的饲料样品，用四分法缩减至500g，粉碎至过 。.45mm孔径的分析筛，混匀，装人密 1 GB/T 19423- 2003 闭容器 。 分析步骤 7.1 试液的制备 7.1.1 提取 准确称取试样 log于具塞三角烧瓶中，加二甲基甲酸胺(DMF)50mL，用电动振荡器振播30min, 用滤纸干过滤，弃取初滤液，收集滤液，备用 7.1.2 柱层析纯化 7.1.2.1