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- | 1999-08-10 颁布
- | 2000-02-01 实施
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GB/r17813-1999
前 言
复合预混料中烟酸、叶酸的测定目前尚无国家标准和国际标准,本标准是在查阅国外文献的基础
上,经过试验比较选择了用高效液相色谱法测定复合预混料中烟酸、叶酸。该方法与美国公职分析化学
家协会(AOAC)方法比较,简便、快速,准确度、精密度效果相当。
本标准在技术内容上参照国外方法,确定了标准范围、试剂、测定条件,即反相离子色谱条件和反相
缓冲液系统条件。在编写格式上依据GB/T1.1-1993《标准化工作导则 第1单元:标准的起草与表述
规则 第1部分:标准编写的基本规定》和GB/T1.4-1988((标准化工作导则 化学分析方法标准编写
规定》。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。
本标准由国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。
本标准主要起草人:陈必芳、李兰、梁冬生。
中华人民共和 国国家标准
复合预混料中烟酸、叶酸的测定
高效液相色谱法 GB/T 17813-1999
Determinationofnicotinicacidandfolicacid
incompoundpremix-
High-pressureliquidchromatography
1 范围
本标准规定了复合预混料中烟酸、叶酸的测定— 高效液相色谱法。
本标准适用于复合预混料和维生素预混料中烟酸、叶酸的测定。测量范围为每千克样品中含烟酸的
量在1000mg以上,含叶酸的量在500mg以上。
2 引用标准
下列标准中所包含的条文,通过在本标准中引用而构成为本标准的条文 本标准出版时,所示版本
均为有效。所有标准都会被修订,使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
GB/T6682-1992分析实验室用水规格和试验方法
3 方法原理
试样中的烟酸、叶酸用水一甲醇一乙酸混合溶液提取,将滤液注人高效液相色谱反相柱上进行分离,
用紫外检测器在280nm波长处定量测定。
4 试剂和材料
除特殊注明外,本标准所用试剂均为分析纯.水为蒸馏水,色谱用水为去离子水,符合GB/T6682的
规定
4.1 甲醇 :优级纯。
4.2 三乙胺
4.3 冰乙酸。
4.4 烷磺酸钠 (PICB6):cCCH,(CHr)5S0,Na)=0.005mol/I{或pCCH,(CH..),SO,NaI
=941mg/I)。
4.5 标准溶液配制
4.5.1烟酸标准贮备液:称取经过干燥的烟酸标准纯品25.0mg,`N.于250ml,棕色容量瓶中,用移动
相溶解,稀释至刻度,于冰箱保存,可放置一周。
4.5.2 叶酸标准贮备液:称取经过干燥的叶酸标准纯品25.0mg,.于250ml容量瓶中,用碳酸钠溶
液(4.8)溶解,调至pH7.。定容至刻度,于冰箱保存。
4.5.3烟酸、叶酸标准工作液 准确吸取4.5.1和4.5.2各10ML,用移动相稀释至50ml或100ML.
该混合标准溶液置于带盖小瓶贮存,供液相色谱仪分析用,当日使用。
国家质量技术监督局1999一08一10批准 2000一02一01实施
Gs/T 17813-1999
4.6 提取液:取500mL去离子水,加10mL冰乙酸((4.3),1.3ml三乙胺(4.2),用去离子水定容至
1I,此时pH为3.2,过0.45pm滤膜,取上述溶液850mL与150mL甲醇(4.1)混合
4.7磷酸缓冲液:称取4.84g的磷酸氢二钾(K,HP0,),9.82g磷酸二氢钾(KH,P04),溶于去离子水
中,加20ml乙腊,用去离子水定容至1L,混匀用2000氢氧化钾调节pH至6.50
4.8 碳酸钠溶液:c(Na,CO,.)=0.1mol/L.
5 仪器、设备
5.1 实验室常用仪器设备。
5.2 超声波水浴。
5.3 超纯水装置(Millipore或全磨口玻璃蒸馏器)。
5.4 离心机:3000r/min.
5.5 高效液相色谱仪:带自动进样器、紫外可调波长检验器。
6 试样制备
选取有代表性的样品至少500g,四
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