GB/T 15686-1995高粱中单宁含量的测定.pdf

中华人民共和国国家标准 GB/T15686-1995 高粱 中单宁含量 的测定 Sorghum-Determinationoftainnincontent 本标准等效采用国际标准ISO9648:1988((高粱中单宁含量测定方法》。 1 主题内容与适用范围 本标准规定了高粱中单宁含量的测定方法。 本标准适用于高粱中单宁含量的测定。 2 引用标准 GB5491粮食、油料检验 扦样、分样法 GB5497粮食、油料检验 水分测定法 3 原理 用二甲基甲酞胺溶液振荡提取高粱中单宁。过滤后取滤液，在氨存在的条件下，与柠檬酸铁按形成 一种棕色络合物，用分光光度计在525nm波长处测定其吸光度值，与标准系列比较定量。 4 试剂及溶液 所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水。 4.1单宁酸标准溶液：2.5g单宁酸溶于水中，定容至1000ml,。该溶液避光、低温保存，一周内稳定。 单宁酸标准来源不同，对测定结果有影响。因此，推荐使用分子量为1701.25的单宁酸作为标准品，并 且配制0.3mg/ml,的单宁酸标准溶液，按6.5.2测得吸光度值应在。.45-0.55范围之内。 4.2 8.0g/L氨溶液：取浓氨水 2（5%-280o)3.6mL，定容至100mL, 4.3 75o(v/v）二甲基甲酞胺溶液：取75mL二甲基甲酞胺，加水约20mL，混匀，放至室温，然后定 容至100mL, 注意：二甲基甲酞胺对肺、皮肤和眼睛有伤害。 4.4 3.5g/L柠檬酸铁铁溶液：柠檬酸铁按试剂铁的含量在1700(m/m)^--20%(m/m）之间；3.5g/L 溶液，使用前24h配制。 5 仪器 叹 月 ︺ ． ． 分析天平：感量0.0001g, ‘ 八 ︺ 了 ‘ 机械粉碎机：带孔径为1.0MM的筛子。 只 0 ﹃ ︺ 中速滤纸。 ‘ 月 口 峪 振荡机。 哎 只 以 ： ︺ 可见分光光度计：10mm比色皿。 亡 」 移液管：50mL, 国家技术监督局1995一08一17批准 1996一01一01实施 GB/T15686-1995 5.7 刻度移液管：1mL,10mL, 5.8 试管。 5.9 容量瓶：25mL,. 5.10 具塞三角瓶:100mL, 6 分析步骤 6．1试样制备 按GB5491取样。 样品弃去杂质，用机械粉碎机粉碎，并全部通过 1.0mm孔径的筛子，充分混匀。 粉碎的高粱试样在避光、干燥的条件下最多保存几天。因此，试样粉碎后应尽快测定。 6.2 水分测定 按GB5497测定试样水分含量。 6.3 提取 称取试样约lg，精确至0.0001g,置于100mL三角瓶中，准确加入50rnL75％二甲基甲酞胺溶 液，加塞子密封，于振荡机上振荡60min，然后用双层滤纸过滤，滤液备用。 6.4 测定 6.4.1用移液管吸取提取液(6（.3)1.0mL，置于试管中，用移液管移加6.0mL水和1.0mL氨溶液， 振荡均匀、静置。自加氨水10min后，以水作空白，用分光光度计在525nm波长处测定吸光度值。 6.4.2 用移液管吸取提取液(6（.3)1.0mL，置于试管中，用移液管移加5.0rnL水和 1.0mL柠檬酸铁 按溶液，振荡均匀，再加1.0mL氨溶液，充分振荡均匀、静置。自加氨水10min后，以水作空白，用分光 光度计在525nm波长处测定吸光度值。 结果为两次测定吸光度值之差。 6.5 绘制标准曲线 测定试样的当天，按以下步骤绘制标准曲线。 6.5.1 用移液管准确吸取。,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL单宁酸标准榕液(4（.1)，分别置于6个25mL 容量瓶中，用75％二甲基甲酞胺溶液稀释至刻度 标（准溶液系列分别相当于。,0.1,0.2,0.3,0.4, 。．5mg/mL的单宁酸含量）。 6.5.2 用移液管分别吸取以上单宁酸标准溶液系列1.0mL,置于6只试管中，各准确加人5.0mL水 和1.0rnL柠檬酸铁钱溶液，振荡均匀，再各加，1.0mL氨溶液，充分振荡均匀、静置。自加氨水10min 后，以水作空白，用分光光度计在525nm波