C型链球菌人工感染猪的临床与病理学观察.pdfVIP

· 《上海畜牧兽医通讯》2011年第2期 · 5 C型链球菌人工感染猪的临床与病理学观察 邓洁汝 王 欢 邓治邦。 (湖南农业大学动物医学院 湖南长沙410128) 【摘要】从湖南五个地市流行的疑似猪败血性链球病例中分离到一株病菌株，生化和兰氏分群法鉴定及基因序 列分析，证明此茵为c型链球菌。以该茵回归健康猪．感染猪临床表现为高热稽留、两耳发紫、皮肤出血；病理学观 察脾被膜上有红色丘状突起、胆囊水肿及胆汁浓稠、肺炎性水肿和小叶肝变、心冠脂肪粘液样变性。人工感染猪的 临床表现及病理变化与临床病例基本一致。 关键词：猪C型链球菌；临床与病理观察；人工感染猪 C群兽疫链球菌没有宿主专嗜性，在猪群中的感染相当 无菌采取死亡小鼠、兔、猪心血接种于血液琼脂平板， 普遍，引起猪的临床表现为败血症、脑膜炎、关节炎，一般呈 37℃培养24～48h。观察其菌落性状和细菌形态。按试剂盒 地方流行性“”。湖南是养猪大省。养猪业在国民经济中占 说明进行牛化鉴定，同时用兰氏分群A～G乳胶凝集试剂做 有相当重要的地位，其总收入占畜牧业总收入的80％。近年 凝集试验，设PBS空白对照和A～G群混合阳性抗原对照“。 来，c群兽疫链球菌病在我省的流行趋势逐步上升，这给养 1．2．4细菌DNA序列分析 猪业造成了巨大的损失。本实验以C群兽疫链球菌人工感 首先用营养肉汤培养待检细菌，参照试剂盒说明书提取 染仔猪．复制出了临床症状与病理变化十分典型的病例．并 细菌DNA。然后以细菌通用引物进行PCR反应扩增细菌 从病理学角度分析感染病例的病理发展过程，为对该病的深 目的DNA“。 入研究提供参考。 PCR扩增体系为25扯l，共做1号和2号两管(2号为一重 Mix 复)，其中Master12．5 1材料与方法 ttl．20pmol／F1的上、下游引物各 1-1材料 0．5弘l。模板0．5L，最后用ddH。O补足到25一。扩增条件： I临床病料来源：采自宁乡、娄底、湘阴、攸县、常德送检疑 95℃预变性5rain，94℃变性30S，59℃退火30S，72℃延伸 1minx 似败血性链球病病猪肝脏、脾脏、肺脏等。 30个循环，然后72℃延伸7rain。最后4℃下保存。 链球菌生化试剂盒：购自广东环凯微生物科技有限 PCR产物凹收按细菌基岗组DNA回收试剂盒的步骤进 公司。 行。同收的细菌基凶组DNA送上海英骏生物技术有限公司 链球菌乳胶凝集诊断试剂盒：德国0x10D公司产品，购测序，得到的序列结果通过去载体序列、拼接。登陆网站 自广东环凯微牛物科技有限公司。 细菌通用引物：上海英伟创津公司合成。 2 结果 Fp：AGAGTTT(；ATCCTG(；CT(：AG； 2．1 鼠、兔死亡情况 Rp：CGGTTACCTTGTTACGACTT‘”。 15只小白鼠在接种后26～53h全部死亡，5只接种兔分 细菌基因组DNA提取试剂盒．快捷型琼脂糖DNA回 别于17、18、23、25、27h死亡。 收试剂盒，购