消旋儿茶素对脑死亡家兔肾的保护作用课件.ppt

消旋儿茶素对脑死亡家兔肾脏的保护作用 Team Members： 05级3班 朱颖婷 陈羽青 金颖 谢波 管小凤 前言 研究目的及内容 材料和方法 实验器材和药品 BL-420E生物机能实验系统 呼吸机 哺乳动物手术器械，注射器若干、丝线若干、试管 颅骨钻（电钻），配2mm、3mm、5mm、6mm钻头 兔台 离心机、分光光度计、水浴加热器，移液器 自制弹性导管、自制流水冷却计 20%乌拉坦，生理盐水，0.3％肝素，消旋儿茶素，蒸馏水，BUN试剂盒，MDA试剂盒，无水乙醇，冰醋酸 back 自制弹性导管 自制流水冷却计 实验准备 1. 18只家兔（3只用于预实验） 随机分为3组: A：假实验组，4只； B：渐进性脑死亡模型不给药组，5只； C：渐进性脑死亡模型给药组，6只。 2. 称重、耳缘静脉麻醉 (20%乌拉坦5ml／kg)，仰卧位固定。 back 脑死亡诱导 气管插管 将家兔转换为俯卧位，开颅，建立脑死亡模型，呼吸机支持（频率45次／min，潮气量31.0 ml，呼吸比1：1），心电检测 家兔松绑，侧卧于兔台，行股静脉插管。 心电检测半小时，稳定 back 药物干预及抽血检测 数据处理 用SPSS10.0进行统计分析 各组间血浆丙二醛（MDA）和尿素氮（BUN）值进行t检验 每组内每个时间点与前一个时间点进行t检验。 脑死亡模型成功率 11只家兔建立脑死亡模型 B组1只未能维持12h，1只呼吸机误停死亡，1只因股静脉取血不成功放弃，但一直进行心电检测，能维持12h；C组1只因股静脉取血不成功放弃，但一直进行心电检测，也能维持12h，1只因橡胶管破裂，生理盐水渗出，模型建立失败。其余家兔在建立脑死亡模型后，机体循环维持12h，最终心率在100次/min左右。 共有8只成功建立模型，故成功率为72.7%。 指标数据 指标数据  表2各组不同时间点血浆MDA的变化(±s) 讨论----关于脑死亡模型的建立 脑死亡模型分两种：急性和渐进式。 急性脑死亡模型：多为模拟急性和重大的脑外伤以致颅内压在30-60s内急剧升高，但却往往导致血流动力不稳定和呼吸衰竭。 渐进式：则模拟颅内压缓慢上升，能使血流动力不稳定性减低且在整个脑死亡过程中保持血压正常4-6小时[13]。 所以，渐进性脑死亡模型供体自动调节血液循环的机会，最大限度地避免循环衰竭和不可逆的血压过低。 讨论----关于脑死亡模型的建立 本实验项目计划参照Pratshchke的渐进式脑死亡模型模型，采用橡胶管（外径4.5mm）制造带球囊导管，以此代替Fogarty导管进行颅内膨胀加压，成功率有72.7%。 与文献[12]（78．9％ 的大鼠在维持机械性人工呼吸6 h的观察中，MAP始终在80～100 mmHg水平）相比，成功率相近。但机体循环的维持未达到文献中的水平。 讨论--消旋儿茶素对脑死亡家兔肾脏的保护作用 肾是机体内最容易产生氧自由基的器官之一。[14] 肾脏组织中氧自由基的主要来源为肾脏固有细胞和浸润细胞。[15] 许多免疫及非免疫的实验研究均已证实氧自由基在急性肾脏损伤中有重要作用。[16] 在某些病理条件下，由于活性氧产生过多或抗氧化酶类减少或活性下降，则可引发链式脂质过氧化反应，损伤细胞膜，进而使细胞死亡。[17] 讨论--消旋儿茶素对脑死亡家兔肾脏的保护作用 研究表明，脑死亡引起的缺血损伤是慢性排斥反应发生的非免疫因素，其产生的氧自由基影响肾脏的长期存活期。 一种是由氧自由基介导的器官血管内皮的损伤，血管壁重塑如平滑肌细胞迁移、分化和增生等；另一种是由氧自由基介导激活内皮细胞，引起炎症，最后导致急性排斥反应发生。[18] 讨论--消旋儿茶素对脑死亡家兔肾脏的保护作用 研究表明，儿茶素能够有效地清除- OH 与MDA，改善肾功能,减轻肾脏进行性损害。[10] 家兔静注给药的儿茶素在体内分布较广或提示其在某些组织中的分布程度较高，体内分布迅速并且消除很快。而内服给药，吸收迅速，但不完全[19]。 故本实验选择静脉（耳缘静脉）注射给药。而本实验中所选药剂是一种新药——消旋儿茶素，属儿茶素类物质，探索其对肾的保护作用及与抗氧化的关系正是此次实验目的所在。 讨论--消旋儿茶素对脑死亡家兔肾脏的保护作用 考虑到经费问题，我们选择以MDA、BUN为指标。 丙二醛（MDA）是脂质过氧化物的降解产物，它的存在标志机体内有脂质过氧化过程的参与。MDA的含量可间接反映氧自由基的产生与组织的损伤程度 测定血中NPN或BUN可