原癌基因PIM3在胰腺癌发生中的作用机制以及分子靶向治课件.ppt

* 原癌基因Pim-3在胰腺癌发生中的作用机制以及分子靶向治疗药物的开发 复旦大学附属肿瘤医院实验研究中心 复旦大学上海医学院肿瘤学系 李 影奕 Pim-3激酶在胰腺癌发生中的作用机制 以Pim-3为靶向治疗分子的新型有效的 抗肿瘤药物的开发 报告内容 Pim-3激酶在胰腺癌发生中的作用机制 p34 p34 p34 p37 p40 Kinase Domain Pim-1 Pim-2 Pim-3 Deneen B. et al. Mol Cell Biol 2003;23:3897 Mikkers H. et al. Mol Cell Biol 2004;24:6104 Pim-3 与恶性转化相关 Pim基因敲出的小鼠生命力旺盛且可繁殖后代 Pim-3是原癌基因。 研究背景 Pim-3 is a proto-oncogene with serine/threonine kinase activity. Fujii C et al. Int J Cancer. 2005 Mar 20;114(2):209-18. Pim-3激酶是否与肝脏以外的其它脏器肿瘤发生有关？ 我们聚焦在同是内胚层来源的器官，胰腺。 Normal Tissue Cancer Tissues Pim-3 蛋白在人胰腺癌组织和胰腺癌细胞株中高表达 PCI55 PCI35 α-Pim-3 Actin 36 43 kDa WCL Pim-3 shRNA Non Scramble Pim-3 PCI55 Pim-3 siRNA 干扰Pim-3蛋白表达，导致人胰腺癌细胞株细胞凋亡，从而降低细胞活力 Scramble shRNA Pim-3 shRNA DNA Content No shRNA SubG1 Annexin V Pim-3 shRNA Scramble shRNA Pim-3 shRNA Scramble shRNA No-shRNA Scramble shRNA Pim3 shRNA 0 1 2 3 4 5 8 7 6 5 4 3 2 1 0 Cell viability ratio Time after passage (days) * * * * Pim-1, Pim-2 Pim-3 ? Bad Ser136 ＋ Survival Factor PI3K AKT Bad 14-3-3 Survival Ser112 Pim-1 and Pim-2 Can Inactiavte Pro-apoptotic Molecule, Bad, by Phosphorylating Its Serine Residues Apoptosis Bad Bcl-XL + Bcl-XL Pim-3 Bad Pim-3/Bad PCI55 20mm Pim-3 和 Bad 的相互作用 a-Pim3 HeLa a-Bad a-IgG IP: PCI35 PCI55 PCI55 25 26 kDa Bad IgG Blot: anti-Pim3 Blot: anti-Bad 50 36 Pim-3 IgG Immunoprecipitation with anti-Pim-3 Western blotting with anti-Bad Washing with Stripping buffer Western blotting with anti-Pim-3 Pim-3 pBad112 Pim-3/pBad112 PCI35 PCI55 20mm Pim-3和磷酸化Bad在细胞质内共定位 Actin Bad pBad112 pBad136 pBad155 Pim-3 26 26 26 26 43 KDa 36 shRNA Non Scramble Pim-3 PCI55 降低Pim-3 蛋白表达可以减少 Bad112磷酸化 小结（1） Pim-3 对于难治性胰腺癌来说是一个很好的靶向治疗分子 以Pim-3为靶向治疗分子的新型有效的抗肿瘤药物开发 胰腺癌是我国十大恶性肿瘤之一 〉早期诊断困难 〉晚期患者手术治疗5年生存率低于5%，发病率等于死亡率 传统的化学治疗存在抗肿瘤能力低，杀伤指数过小，副作用大等缺点 分子靶向治疗具有特异性强，效果显著，正常组织损伤小等优点 现有的抑制增殖因子受体活性的分子靶向治疗缺乏肿瘤治疗的特异性，而且容易产生耐药性 研究背景 Pim-3作为药物靶点，特异性更强。