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DNA重组技术的基本工具丁国红
* 课前预习提问: 1、基因工程概念 2、DNA重组技术的基本工具?各个工具的作用? 3、什么是黏末端?什么是平末端? 4、DNA连接酶分哪两类?有什么区别? 5、运载体需具备的条件? 知识回顾 1、基因工程需要的工具有限制酶、DNA连接酶和运载体;需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶。 2、限制性核酸内切酶又称限制酶,其主要从原核生物中分 作用:特异性切割DNA 作用特点:识别特定的核苷酸序列,并在特定的部位进行切割。 作用部位:两个核苷酸之间的磷酸二酯键 结果:形成黏性末端和平末端。 3、DNA连接酶作用:连接DNA片段之间磷酸二酯键。 根据酶的来源不同,可分为E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶 4、运载体:将体外重组DNA导入受体细胞 。 5、常用质粒作为运载体,具有以下特点:(1)能自我复制(2)具有一个或多个限制酶切割位点,便于外源基因插入(3)具有标记基因,可以鉴定目的基因是否进入受体细胞。 1.1 DNA重组技术的 基本工具 学习目标 1、简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用 2、总结基因工程运载体需要具备的条件 3、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新 预习反馈 1、问题 (1)三种工具及作用表述不确切(如分子运输车:质粒;限制酶:切割DNA分子,获取目的基因) (2)质粒的特点总结不全面 2、表扬 × × 合作探究 反思总结 2、(3)⑤ 2、(2) ② 1、2、(1)② 点评 展示 一组 二组 三组 四组 五组 六组 EcoRI (在G和A之间切割) Smal (在G和C之间切割) 黏性末端 平末端 同一种限制酶切割后形成的两个末端是什么关系? 反向重复序列 *
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