《一般毒性实验》ppt课件.pptxVIP

一般毒性实验 1 第一节：急性毒性试验 急性毒性参数 危险性评估 慢性毒性试验 毒作用机制 试验目的 第一节：急性毒性试验 经口急性毒性试验：LD50 经呼吸道静式吸入式急性毒性试验：LC50 经皮肤急性毒性试验：LD50 最常用的方法是测定LD50 这又是为什么呢？ 化学品 LD50，mg/kg 乙醇 10000 氯化钠 4000 硫酸亚铁 1500 硫酸吗啡 900 苯巴比妥钠 150 印防己毒素（苦味素） 5 硫酸士的宁（番木鳖碱） 2 尼古丁 1 筒箭毒碱 0.5 密胆碱 0.2 河豚毒素 0.1 二噁英 0.001 肉毒杆菌毒素 0.00001 一些常见化学物的急性LD50 LD50 死亡率随剂量变化最敏感的是中段，由此不难理解将半数致死量作为判定化学物毒性指标的原因。 LD50 or LC50 经典急性毒性试验 曲线拟合法 Bliss 法 插值法 累积法、改良寇氏法、霍恩法 LD50的测定 方法 优点 缺点 霍恩法 使用动物数少； 计算简便 95%可信限范围大，精确度不够 改良寇氏法 计算简便， 准确率高 确定最低和最高 剂量组 序贯法 节省动物 化学物引起动物 快速死亡 Bliss法 设计要求不太严格 最精确 计算复杂 死亡率呈正态分布。最小剂量组的死亡率20%，最大剂量组的死亡率80%。 剂量按等比级数分组； 改良寇氏法适用条件 各组动物数应相等； 观察时间 毒性反应观察 染毒途径与方式 剂量与分组 选择实验动物 某化学物LD50的测定 种属和品系： 年龄和体重： 数量和性别： 啮齿类常用小鼠或大鼠。非啮齿类常用狗或猴。 变异不应超过该批平均体重的20％。小鼠：18～22克。大鼠：180-220克。 小动物每组10只。雌雄各半。 选择试验动物 无相关资料 了解结构和性质相似化学物的毒性资料，确定预期毒性中值。 以此与其毒性中值作为待测化学物的中间剂量组，并在该剂量的上下各设2个剂量组为预试验剂量。 剂量与分组 灌胃、喂食、吞咽胶囊 静式吸入、动式吸入 经皮肤染毒 经注射染毒 定性试验、定量试验 注射量的规定 经口染毒 呼吸道染毒 染毒方式 中毒症状 死亡情况 病理变化 毒性作用观察 器官或系统 观察项目 中毒后常见的表现 皮肤和被毛 眼睛 植物神经系统 呼吸系统 泌尿生殖系统 CNS和 神经肌肉系统           颜色张力 眼睑 眼球 角膜 瞳孔大小 腺体分泌 鼻 呼吸表现 阴户 乳腺 阴茎 行为 运动状态   对刺激反应性   脑脊髓反射 肌肉张力 皮肤充血 紫绀 被毛蓬松 污秽 眼球突出，充血，角膜混浊，血性分泌物 散大或缩小 流涎 流泪 鼻孔溢液 鼻翼扇动 徐缓 过速 困难 衰竭 肿胀 分泌物增多 会阴部污秽 脱出 体位异常 叫声异常 活动异常 呆卧少动 痉挛 抽搐 震颤 强直 麻痹 运动失调 易兴奋 感觉迟钝或过敏 反应低下或过高 减弱或消失 松驰或紧张 一般为14天 观察时间 C57 Kunming 急性毒性分级 急性分级 大鼠经口LD50(mg/kg) 6只大鼠吸入4h，死亡2-4只浓度(ppm) 兔经皮LD50 (mg/kg体重) 对人可能致死的估计量 g/kg体重 g/60kg体重 剧 毒 1 10 5 0.05 0.1 高 毒 1 10 5 0.05 3 中等毒 50 100 44 0.5 30 低 毒 500 1000 350 5 250 微 毒 5000 10000 2180 15 1000 外源化合物的急性毒性分级(WHO，2003) 第二节：局部毒性试验 皮肤刺激试验 急性眼刺激试验 2.1.急性眼刺激试验 观察时间：7天，可延长至21天 观察指标：结膜、角膜、虹膜 染毒方式：一侧眼结膜囊内 剂量：一次剂量 实验动物：家兔 2.1.急性眼刺激试验 2.2.皮肤刺激试验 观察时间：不超过14天 观察指标：红斑、水肿 染毒方式：涂抹于动物皮肤上 剂量：一次或多次剂量 实验动物：家兔、豚鼠 2.2.皮肤刺激试验 第三节：亚慢性和慢性毒性试验 概念 第三