《cart基础知识》ppt课件.pptx

CAR-T基础知识;导言： CAR-T（嵌合抗原受体T细胞）药物是一种有生命的药物，原理在于经嵌合抗原受体修饰的T细胞，可以特异性地识别肿瘤相关抗原，使效应T细胞的靶向性、杀伤活性和持久性均较常规应用的免疫细胞高，从而发挥抗癌作用。CAR-T细胞疗法在早期的临床试验中并没有表现出惊人的疗效，然而随着抗CD19 CAR-T细胞疗法在B细胞恶性肿瘤中显示出的巨大潜力，CAR-T产品一时间成了抗肿瘤领域的新星。;什么是CAR-T细胞;T淋巴细胞是肿瘤细胞的天敌，在肿瘤免疫应答中起重要作用，对肿瘤细胞有极强的杀伤作用。 对T细胞进行基因工程处理，从而在其表面表达能够识别特异性肿瘤抗原的特殊受体称为嵌合抗原受体（CAR），同时在受体的胞内段可加上引起T细胞活化的信号传递区域。 肿瘤对患者的免疫系统具有抑制作用，限制了自身免疫功能的诱导和激活，因此可以把患者的免疫细胞放到一种可以避开肿瘤抑制因素的环境中进行激活和扩增，然后再将扩增后的免疫细胞回输患者，从而使患者的免疫功能迅速增强，达到杀伤肿瘤细胞的作用，这种疗法就是过继性免疫疗法;CAR-T技术原理： 嵌合抗原受体（CARs）是由一个胞外抗原识别域（通常是一个单链抗体，也可以是多肽或者其他蛋白质）和一个胞内信号域组成。CAR的胞外部分用来识别特异性的肿瘤抗原，随后胞内信号域会刺激T细胞增殖，并且通过细胞溶解和细胞因子释放来消除肿瘤细胞。;第一代CARs的胞内信号域是CD3ζ信号链（signal 1），这一代产品在临床试验中效果有限，可能由于移植T细胞的活化诱导细胞死亡（AICD）或者T细胞扩增的持续性不好所导致。 第二代CARs相比第一代CARs增加了一个胞内共刺激信号域（signal 2）。在过去的5年里，对于第二代含有CD28或者4-1BB(CD137) 共刺激信号域的抗CD19 CAR-T，在治疗B淋巴细胞白血病的临床试验中都表现出优异的疗效，但是仍然需要寻找更好的共刺激信号分子，来解决第二代CAR-T产品作用不持久等问题。 第三代CARs不仅包含CD3ζ信号域，还包括两个共刺激信号分子（图1），这些共刺激信号分子主要包括CD28、4 -1BB以及OX40 (CD134)等，在临床前研究中发现第三代CAR-T细胞疗法效果要优于第二代产品;CAR构成（1）----scFV（单链抗体）;CAR构成（2）----TCR/CD3/ζ;CAR构成（3）---- co-stimulator ;CAR-T细胞的发展过程;CAR-T细胞的发展过程;T细胞激活需要双信号;CAR-T细胞的发展过程;2nd 3rd generation CAR结构示意图;CAR-T细胞的发展过程;CAR-T技术中TAA概念;CAR-T细胞治疗技术的五大优势（1）;CAR-T细胞治疗技术的五大优势（2）;CAR-T细胞治疗技术的五大优势（3）;CAR-T细胞治疗技术的五大优势（4）;CAR-T细胞治疗技术的五大优势（5）;CAR-T细胞疗法的治疗过程 CAR-T细胞的生产和治疗主要有以下几个步骤： （1）白细胞分离：将病人的T细胞从外周血中分离出来； （2）T细胞活化：使用抗体包被的磁珠（人工树突状细胞）来激活T细胞；（3）转染：在体外对T细胞进行基因改造，使其表达嵌合抗原受体； （4）扩增：基因修饰过的T细胞在体外扩增； （5）化疗：在T细胞回输之前对病人进行化疗预处理； （6）回输：将基因修饰过的T细胞回输入病人体内（图2）。;CAR-T细胞基因转导的方法;CAR-T细胞临床应用中的问题;CAR-T细胞存在问题的可能解决办法;小结： 目前来看，CAR-T细胞疗法在血液癌的治疗中已经取得惊人的效果，尤其是针对B细胞急性淋巴细胞白血病患者的初期缓解率可以达到90%左右。 但是取得显著疗效的CAR-T主要还是集中为靶向CD19的产品，CD19是仅仅表达在B细胞表面的特异性抗原，利用CAR-T与CD19抗原结合，从而消除B细胞。通常只能在血液恶性肿瘤（白血病、淋巴瘤等）中起到良好的治疗效果。因此，CAR-T研发要取得长远的成功必须解决两个问题：寻找CD19之外的可以与CAR-T有高度亲和力的抗原靶标，以及将CAR-T的适应症从血液肿瘤逐步转向实体瘤这个更大的治疗市场。 研究人员也在积极设计开发新型的CAR-T疗法，期望在其他血液肿瘤以及实体瘤种发挥类似疗效。寻找CD19以外的新型的有潜力的抗原靶标，减少毒副反应，克服肿瘤微环境中的免疫抑制作用是目前亟需解决的问题;谢谢