从流产病猪--分离病毒发表的文章.PPT

猪圆环病毒病/猪流感及其防治 猪流感和猪圆环病毒都是免疫抑制病的主要病原，危害不容忽视。是PRDC，PMWS等的主要病原。 猪圆环病毒严重危害养猪业，关键在于提高饲养管理水平。 只要管理得当，猪流感一个礼拜可以自愈。 体温检测和喝水量监测。 致谢 谢谢主办单位给我这次机会。 谢谢各位同仁聆听及参与，希望可以提出宝贵意见，您的宝贵意见是我们工作改进、取得进步的源泉之一。 欢迎各位到中国农业科学院哈尔滨兽医研究所做客；欢迎有需要的朋友一起合作，实现共享共赢。 4.3 ELISA及PCR 如果病料中含有病原，一般容易分离成功。中和试验、ELISA试验也可用于临床急性期、恢复期猪血清抗体检测，根据抗体水平的变化规律作出诊断。 Nested-PCR诊断技术也可用于该病的诊断。 4.4 电镜观察 电子显微镜负染技术可以在电镜下区分引起神经症状的其它病原，如狂犬病、伪狂犬病等。 但是对于同样的小RNA病毒科的其它成员则不能够区分。 免疫电镜技术是结合电镜技术和免疫学技术的优点，在标准阳性血清的作用下，可用于病毒的鉴别诊断。 4.5 血清学诊断方法 PTV的血清学诊断方法有免疫荧光试验(IFA)， 酶联免疫吸附试验(ELISA ) 、斑点酶联免疫吸附试验( Dot-ELISA)及病毒微量中和试验(VN ) 等。 目前应用最广泛的是IFA和ELISA。 4.6 分子诊断技术 聚合酶链式反应(PCR)在猪捷申病毒和肠道病毒诊断中，和其它诊断方法相比，具有敏感、特异和快速的特点，但同时也局限于实验室条件，并且需要具备一定的技术性操作，无法进行现地快速、简便的检测和诊断。 4.7荧光定量PCR 在此基础上发展起来的nested-PCR和荧光定量PCR方法，在敏感性上又有一个提高。但是荧光定量PCR因为仪器的昂贵而受到限制。PTV其它的分子诊断技术的报告很少。 4.8 鉴别诊断 猪捷申病毒与其它引起繁殖障碍、神经性症状的病毒，如PRRSV、CSFV、PRV、ASFV、CSFV、PRV、PPV、EMCV等引起的临床症状相似，应注意与这些疾病的鉴别诊断。 除此之外，随着分子生物学技术的发展，快速简便的鉴别诊断方法也应运而生。 应用RT-PCR方法进行捷申病毒和猪肠道病毒Ⅱ型的鉴别诊断、应用nested-PCR进行的猪肠道病毒分群和鉴别、应用针对VP1主要抗原位点的PCR进行猪捷申病毒的分群及血清型鉴定。 五、国外消灭该病的措施及历程 国外对于本病的研究，己有较长的历史和良好的基础，而目己证实该病毒疫苗免疫效果良好。 早期多用病猪或人工感染猪组织悬液所制成的氢氧化铝灭活苗，或者表达VP1作为亚单位疫苗效果也很好。 几个实例 20世纪50年代初期，该疫苗在东欧一些国家使用后，猪捷申病病死率从5.27%降至0.03%，在严重疫区，对全部易感猪注射后，未见本病的再发生。 50年代末期，Mory和 Correns用猪捷申病毒血清Ⅰ型Konratice株在猪肾细胞连续传100代以上，培育成功弱毒变异株，制成弱毒活疫苗或灭活疫苗，可诱导仔猪产生相应的保护性抗体，采取人工攻毒(脑内接种)的方法，保护率在80%以上。 Teschen disease (Teschovirus encephalomyelitis)eradication in Czechoslovakia: a historical report 六、在我国的发现及流行情况 我国台湾相关研究显示，台湾猪场PTV病毒分离率为20%，仅次于PCV2的阳性率。台湾调查结果表明：猪捷申病是近年来猪只的新兴疾病。 全台湾猪只抗体检测显示，猪群的阳性率占七成，同时每年的猪只病毒性疾病的检诊服务，也显示猪捷申病毒的检出率，居所有猪只疾病之首，可见该病己普遍存在于台湾猪群。 流行的血清型 由于猪捷申病病毒有11种血清型，为了解台湾存在该病毒血清型的数量及其分布于各县市的情形，透过收集各县市的猪只粪材拭子，用猪肾脏细胞株分离猪捷申病毒，并采用RT-PCR方法，扩增病毒的部分VP1片段，测序后，与猪捷申病毒不同血清型病毒株进行亲缘性分析。 结果显示，在78株分离株病毒中，涵盖了猪捷申病毒的十种血清型，只缺第5血清型，而各血清型之分布，亦无地域的区隔。 国内情况 2003年，我所首次有分离到PTV-1的报道。 后本实验室又在某发病猪场分离到PTV- 8型病毒。 童光志等分离到PTV-2杂交株。 后来我们调查分离到PTV-4，5，6，7，8型，但以8型最多。 说明国内猪群也存在PTV的感染。但是对此病毒在国内大陆的流行情况和危害还不清楚。 血清学调查 对黑龙江、山东、天津和河南等地进行的血清学初步调查表明，猪场阳性率从44%-90%不等。 715份血清中有399份呈PTV抗体阳性，平均阳性率为55.8%。 同一窝