《白细胞检验》课件.ppt

白细胞检验 第一节 白细胞生理概要 外周血常见白细胞的种类与功能 白细胞的寿命和归宿 学习目标 1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项 2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形态 4.学会白细胞分类计数方法 外周血常见白细胞的种类与功能 (一)外周血常见白细胞的种类 1.白细胞的形态： 无色有核，球形，直径7μm～25μm。 2.白细胞的种类（形态分类）： 三类五种-------- 中性粒细胞（N） 粒细胞 嗜酸粒细胞（E） 嗜碱粒细胞（B） 白细胞 淋巴细胞 （L） 单核细胞 （M） 白细胞的发育 起源于骨髓多能造血干细胞。 白细胞的功能 中性粒细胞：具有较强的运动能力和吞噬活性。胞内酶有复杂的杀菌系统。 嗜酸粒细胞：可作变形运动，吞噬抗原抗体复合物，灭活组织胺减轻过敏反应。 嗜碱粒细胞：与IgE具有较强的结合力，脱粒释放组胺导致速发性变态反应。 淋巴细胞：参与体液免疫和细胞免疫。 单核细胞：有强大的吞噬功能，传递抗原信息。 白细胞的寿命 粒细胞： 10～15天 淋巴细胞：数天～20余年 单核细胞：数月 白细胞的归宿 衰老的粒细胞被单核-吞噬细胞系统清除，也有一部分从口腔、气管、消化道和泌尿生殖道排出。 B淋巴细胞经抗原刺激后分化为浆细胞，产生特异性抗体，参与体液免疫。T淋巴细胞经抗原致敏后，可产生多种免疫活性物质，参与细胞免疫。 粒-单核系祖细胞在骨髓经分化成原始单核细胞后发育为成熟单核细胞，释放入血液。 学习目标 1.叙述白细胞显微镜计数法的原理、试剂组成、注意事项。 2.学会白细胞显微镜计数法的操作方法 3.准确识别外周血常见正常和异常白细胞形态。 4.学会白细胞分类计数方法。 显微镜计数法 【原理】 用白细胞计数稀释液，将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后，混匀充入计数池中，在显微镜下计数一定容积内的白细胞数，经换算即可求得每升血液中白细胞的总数。 显微镜计数法 【器材】 1.显微镜（目镜10×；物镜10×） 2.微量吸管（Hb吸管） 传统的Hb吸管玻璃上有10μl和20μl（误差＜±1%）两个刻度。使用前应经严格校正。橡胶乳头提供负压 Hb吸管的消毒清洗 每次使用后，应经2ｇ/Ｌ过氧乙酸浸泡2ｈ消毒。然后依次用蒸馏水冲洗，→0.95Ｌ/Ｌ乙醇除脂脱水，→乙醚干燥后，才能再次使用。注意清洗的顺序不可颠倒。 显微镜计数法 3.计数池 显微镜计数法 3.计数池 各池刻划有9ｍｍ2面积的刻度，分为 9个大方格，每格长、宽各1ｍｍ，面积1ｍｍ2，体积为 0.1ｍｍ３，容量 0.1μl。 计数白细胞的四个大方格 四个角的大方格都用单线划分为16个中方格，为计数密度小的（白）细胞用。 容量： 0.1μl/大方格 计数红细胞的五个中方格 中央的一个大方格，用双线划分为25个中方格，每个中方格又被单线划分为16个小方格，共有400个小方格，供计数密度大的（红）细胞用。 容量： 0.1μl/大方格 0.004μl/中方格 ４.盖玻片 特制的计数池专用盖片，要求玻璃表面平整光滑，有一定重量，不被细胞悬液所抬浮，厚度应为0.4ｍｍ～0.7ｍｍ。盖玻片两面的平整度是：0.002ｍｍ以内， 大小: 24mm×20mm×0.6mm。 显微镜计数法 【试剂】 白细胞稀释液 冰乙酸 2.0ｍｌ 10g／Ｌ亚甲蓝（或结晶紫）数滴 蒸馏水加至100ｍｌ 稀释液中各组分的作用 蒸馏水— 低渗溶解红细胞， 乙 酸— 可加速红细胞溶解，同时乙酸能固定核蛋白，使白细胞核显现，便于辨认。 染 料— 使核略着色，且易与红细胞稀释液 区别。 显微镜计数法 【操作】 １．取小试管１支，加入白细胞稀释液0.38ｍｌ。 ２．用微量吸管准确吸取外周血20ul。 ３．擦去管尖外部余血，立即将吸管插入盛有稀释液的试管底部，轻轻将血放出，并吸取上清液漱洗吸管２次～３次，注意每次不能冲浑稀释液，最后用手振摇试管混匀。 操作 ４.充液 将计数板和盖玻片擦净，盖片盖在计数池上，用毛细滴管或玻璃棒取已混匀的细胞悬液1滴，充入计数池与盖玻片间的缝隙中，静置2min～3min，待白细胞下沉。 镜下白细胞形态 似成熟蚕卵，中央核深染，胞质色