微生物标本的采集及外科常见耐药菌的分析讲解课件.ppt

微生物标本的采集及外科常见耐药菌的分析 检验医学部微生物室 廖康 微生物培养标本采集常见的问题 血培养 导管的送检 痰标本的采集 脓性分泌物的采集 尿液标本 厌氧菌培养 真菌感染的检测 血培养 采血时机： ⑴发热、发冷初期，抗生素使用前。 ⑵T＞38℃或＜36℃ 套瓶采集：需氧+厌氧 采血量：成人5-10ml/瓶，小儿3-5ml/瓶 血培养采样建议 急性高烧：10分钟内，不同部位抽取2套标本(建议左、右手)。 非急性高烧：24h内，由不同部位抽取2-3套标本(间隔不小于3小时) 急性心内膜炎：1-2小时内，同3个不同部位抽取3套标本。 亚急性心内膜炎：24h内，由3个不同部位抽取3套标本，每套间隔≥1h。当培养24h后，若为阴性，应再送2-3套标本。 血培养采样建议 不明发热：由不同部位抽取2-3套标本，每套间隔≥1h。当培养72h后，若为阴性，应再送2-3套标本。 小儿病患，应立即采血。 多部位采血的意义 增加样本量→提高阳性检出率 排查污染菌(如凝固酶阴性葡萄球菌、G+杆菌等) 导管的送检 导管相关性菌血症的送检 痰标本的采集 脓性分泌物的采集 深部脓肿：无菌操作，用注射器抽取标本→绿头管送检。 表浅标本：无菌盐水清洗表面→擦干→无菌棉拭用无菌盐水湿润，挤干→采集深部脓性分泌物→绿头管送检。 尿培养标本 厌氧菌培养 深部抽取的液体标本 深部脓性分泌物 微生物培养的标本储存 真菌感染的检测 传统的固体培养基培养方法→非血液样本 血液的真菌感染难以检测： ⑴培养仅限于念珠菌属、新型隐球菌、马尔尼菲青霉菌。 ⑵血培养真菌报阳时间：培养1-3天后。 血清学方法(早期诊断，早于临床症状及影像学症状) 念珠菌血症 目前微生物室开展的血清学项目 G试验(1，3-β-D葡聚糖检测) 深部真菌抗原检测： 曲霉菌抗原(GM试验) 念珠菌抗原 隐球菌抗原 G试验 GM试验 G试验送检要求 适用的标本：血浆，腹水，尿，脑脊液 容器：专用的无热原采血管(暂需到微生物室领取) 建议采样时间：早晨空腹，给药前。(主要尽可能排除食物、药物的影响) 送检时间：周一至周五上午10点前。节假日不收标本。 不合格标本：溶血、黄疸、脂浊 GM试验的检测要求 适用的标本：血清，BAL，尿，脑脊液 容器：黄色头采血管 建议采样时间：早晨空腹，给药前。(主要尽可能排除食物、药物的影响) 送检时间：周一至周五上午10点前。节假日不收标本。 不合格标本：溶血 2007-2008年外科常见耐药菌的药物敏感性 革兰阴性杆菌的构成 主要的耐药机制 超广谱β内酰胺酶(ESBL) 头孢菌素酶(AmpC酶) 肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC) 碳青霉烯酶、外排泵等(非发酵菌) 超广谱β内酰胺酶(ESBL) 主要产酶菌种：大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌，产酸克雷伯菌。 诱因：三代头孢菌素的过度使用。 用药提示：青霉素、头孢菌素、氨曲南临床治疗无效。 可选药物：碳青霉烯类、头霉素类、β内酰胺类/酶抑制剂复合药。 大肠埃希菌 2007年ESBL发生率：61.8%(123/199) 2008年ESBL发生率：53.3%(97/182) 大肠埃希菌(ESBL) 肺炎克雷伯菌 2007年ESBL发生率：41.7%(25/60) 2008年ESBL发生率：51.3%(40/78) 肺炎克雷伯菌(ESBL) 头孢菌素酶(AmpC酶) 主要产酶菌种：阴沟肠杆菌。 诱因：三代头孢菌素的过度使用。 用药提示：1-3代头孢菌素、 β内酰胺类/酶抑制剂复合药、头霉素类耐药。 可选药物：碳青霉烯类、四代头孢菌素。 阴沟肠杆菌 肠杆菌科的碳青霉烯酶(KPC酶) 主要产酶菌种：肺炎克雷伯菌等肠杆菌科细菌。 预警：厄他培南MIC≥2μg/ml 用药提示：提高碳青霉烯类的治疗浓度，避免低水平诱导耐药菌株。建议联合用药。 铜绿假单胞菌 鲍曼不动杆菌 小结 肠杆菌科细菌对碳青霉烯类、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星敏感性高。 大肠ESBL略有下降(61.8%→53.3%)，肺克ESBL有上升(41.7%→51.3%)。 铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星耐药率低。 鲍曼不动杆菌的感染及耐药性逐年上升。 革兰阳性球菌的构成 革兰阳性球菌的标本分布 苯唑西林耐药的葡萄球菌(MRS) 主要菌种：金黄色葡萄球菌，凝固酶阴性葡萄球菌。 原因：细胞壁上青霉素结合蛋白(PBPs)的改变。 用药提示：所有β内酰胺类抗生素临床治疗无效。 首选药物：利奈唑胺，替考拉宁，万古霉素。 MRSA MRSCON 葡萄球菌对糖肽类的中介率有所上升。 MRSA：万古霉素2007年0%，2008年1.9%。 MRSCON：万古霉素2007年6.2%；20