大鼠免疫球蛋白EIgEIgE酶联免疫分析ELISA.PDF

E(IgE) ELISA E(IgE) ELISA 大鼠免疫球蛋白EE((IIggEE))酶联免疫分析（EELLIISSAA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相 关液体样本中免疫球蛋白E(IgE)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠免疫球蛋白E(IgE)水平。用纯化的大鼠IgE抗 体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大鼠免疫球蛋白E(IgE)，再 与HRP 标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜 色的深浅和样品中的大鼠免疫球蛋白E(IgE)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光 度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠免疫球蛋白E(IgE)浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存 说明书 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1个 1个 酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：540μg/ml 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存 标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存 酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 样品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 显色剂B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存 浓缩洗涤液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次 离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞 浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分 钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 1 5. 组织