中药制剂的卫生学检查.ppt

第四章中药制剂的卫生学检查 第四章中药制剂的卫生学检查 微生物按其形态分为 第四章中药制剂的卫生学检查 细菌的基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞细胞核 细菌的形态学检查：涂片、干燥、固定、染色 细菌的生长繁殖条件 充足的营养：水、无机盐、碳源、氮源、生长因子。 适宜的酸碱度：一般为pH7.2～7.6；另外：霍乱弧菌为pH8.4～9.2；乳酸杆菌为5.0左右。 适宜的温度 必要的气体环境。 细菌的繁殖方式与速度 繁殖方式：二分裂法 繁殖分为四个时期：迟缓期、对数生长期、稳定期、衰退期 细菌的代谢产物 毒素：细菌能产生对机体有害的毒素。内毒素由G-菌产生，外毒素多由G +菌产生，但少数G-菌也能产生外毒素。 侵袭性酶：某些细菌能产生侵袭性酶，损伤机体组织，如金葡球菌产生的血浆凝固酶等。 热原质：许多G-杆菌及少数G +杆菌，能产生一种耐热物质，注入人体或动物体内可致发热反应，称为热原质。特点：耐高温，一般的高压蒸气灭菌法不易破坏。可用蒸馏、吸附、滤过等方法除去液体中的大部分热原质。 细菌的代谢产物 色素：许多细菌在一定条件下产生色素，如金葡菌、绿脓杆菌等，可用以鉴别细菌。 抗生素：指某些微生物在代谢过程中产生的，能选择性掏和杀灭它种生物细胞的代谢产物。 细菌素：某些细菌能产生一类具有抗菌作用的蛋白质，其抗菌范围狭窄，仅对近缘细菌有抗菌作用，主要用于细菌的分裂和流行病学调查。 分解代谢产物 糖代谢产物： 主要有酸类（甲酸、乙酸和乳酸）、醇类（乙醇、丁醇、乙酰甲基甲醇等）、酮类和气体（二氧化碳、氢气）。例如大肠埃希菌能分解乳糖和葡萄糖，产酸并产气；伤寒杆菌能分解葡萄糖，产酸不产气。 蛋白质代谢产物： 如大肠埃希菌能分解色氨酸产生靛基质；沙门菌能分解胱氨酸等含硫氨基酸产生硫化氢气体。 细菌的生理学检验 培养基的种类：基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧培养基。 常用的培养基的制备程序：配料、溶化、调整pH值、滤过、分装、灭菌、检定、保存等步骤。 细菌的接种方法：平板曲线划线法、斜面接种法、倾注平板法、穿刺接种法 细菌的培养方法：一般培养法、二氧化碳培养法、厌氧培养法 真菌 真菌的菌落分类： 酵母型菌落 酵母样菌落 丝状菌落 多细胞真菌 微生物限度检查法 染菌限度检验原则 常用稀释液、试液、指示液及培养基（自学） 细菌、霉菌及酵母菌计数 控制菌检查 微生物限度标准 染菌限度检验原则 无菌操作室技术要求： 1.无菌操作室应为单向流空气区域，附近应无污染源。 2.无菌操作室内环境洁净度应达到1万级，操作台面的洁净度应达到100级。室内温度应控制在25℃±2℃，湿度应控制在45～60%。 3.检验全过程应严格遵守无菌操作，防止再污染。 染菌限度检验原则 供试品抽样、保存及检验量 按批号随机抽样，每批取检验用量的3倍量。 检验量：指一次检验所需的供试品量. 除另有规定外， 固体和半固体制剂的检验量为10g； 液体制剂为10ml；采用沙门菌的供试品，其检验量应增加10g或10ml。 中药膜剂为50cm2(不得少于4片)； 染菌限度检验原则 贵重药品、微量包装药品的检验量可酌减，但内服药不得低于3g； 外用药不得低于5g； 所用的剂量的检验量必须取自2个以上的最小包装单位。 取供试品检验时，应注意摇匀，以便均匀取样。 染菌限度检验原则 供试液的制备 液体供试品：取供试品10ml，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，混匀，作为1：10的供试液。油剂可加入适量无菌TW-80。 固体、半固体或黏稠性供试品：取供试品10g，加pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，用匀浆仪或其他适宜方法混匀后，作为1：10的供试液。 染菌限度检验原则 　非水溶性供试品: 方法1 ：取供试品5g（或5ml），加至含溶化的（温度不超过45℃）5g 司盘80、3g单硬脂酸甘油酯、10g 聚山梨酯80 无菌混合物的烧杯中，用无菌玻棒搅拌成团后，慢慢加入45℃的pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，边加边搅拌，使供试品充分乳化，作为1∶20 的供试液。 方法2： 取供试品10g，加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯和无菌玻璃珠的适宜容器中，必要时可增加十四烷酸异丙酯的用量，充分振摇，使供试品溶解。然后加入45℃的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液100ml，振摇5～10 分钟，萃取，静置使油水明显分层，取其水层作为1∶10 的供试液。 染菌限度检验原则 膜剂供试品:取供试品50cm2，剪碎，加50ml或100ml的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液浸泡，振摇，作为1：10或1：20的供试液。 肠溶或结肠溶制剂的供试品：取供试品10克，加pH6.8无菌磷酸盐的缓冲液（用于肠溶制剂）或