孕妇血浆脂肪酸气相色谱-质谱联用分析方法的建立-预防答辩PPT.ppt

气相色谱质谱法 具有气相色谱和质谱两者的优势，即具备GC的高分离效率和MS强大的定性定量能力； 可获得多种定性定量信息，对分析复杂混合物最为有效，被称为分离与鉴定方法最圆满的有机结合体； 应用领域较为广泛，如对食品农药、兽药、激素残留等有害物质的定性定量检测。 结 论 在分析人体血浆脂肪酸的方法中，GC-MS联用技术是目前较为精准、可行、有效的分析技术 致 谢 本人的学位论文是在我的指导老师刘开永博士的亲切关怀和悉心指导下完成的。他严肃的科学态度，严谨的治学精神，精益求精的工作作风，深深地感染和激励着我。从课题的选择到项目的最终完成，刘老师都始终给予我细心的指导和不懈的支持。同时也感谢韩艳萍学姐在实验和论文完成过程中提供的帮助。 在此，我也要感谢在一起愉快的度过大学生活的每个可爱的同学们和尊敬的老师们，还有学长学姐们，正是由于你们的帮助和支持，我才能克服一个一个的困难和疑惑，直至本文的顺利完成。 值此论文完成之际，谨向所有关心、支持、帮助我的领导、老师和同学表示最诚挚的感谢！ 最后，向在百忙中抽出时间对本文进行评审并提出宝贵意见的各位专家表示衷心地感谢！ 人血浆脂肪酸的气相色谱-质谱联用分析方法的建立 指导老师：刘开永博士 本 科 生： 张 洋 专 业： 预 防 医 学 人血浆脂肪酸的气相色谱-质谱联用分析方法的建立 　　研 究 背 景　 　　　　　　　研 究 目 的 　　　　　　　对 象 与 方 法 　　　　　　 结 果 　　　　　　 讨 论 结 论 研 究 背 景 脂肪酸是人体三大营养素之一，对人体的许多生理活动具有重要作用 孕妇在孕期是体内的必需脂肪酸水平与孕妇的营养和胎盘功能及胎儿血液脂肪酸水平及其生长发育有密切关系 血液游离脂肪酸的分析方法有多种，但以气相色谱-质谱(GC-MS)联用法应用较为广泛。目前，对这些分析方法的研究报道尚较少。 研究目的 对孕妇血液脂肪酸的进行定性定量的分析研究 建立指导孕妇孕期脂肪酸补充参考量 重点探讨GC-MS联用技术对血液脂肪酸分析方面的优势和不足 对象与方法 1.研究对象 2010年11月至2011年6月在合肥市妇幼保健院产科病房入院待产的孕产妇及其分娩的新生儿 2.研究方法 血样的采集与保存：孕妇入院待产时，使用无菌注射器抽取3ml肘静脉血，分娩时抽取3ml脐带血于EDTA-K2抗凝管中，所有血标本分别3000r/min离心15min，分离血浆，-80℃保存备用。 实验条件的优化：首先用37种脂肪酸甲酯的标准品进样定性分析，观察各种脂肪酸甲酯大概的相应值范围和保留时间，经过多次优化，最终达到理想的实验条件。 血浆预处理及测定：先对血浆进行衍生化处理，所得样液用GC-MS联用仪分析，所得结果通过与标准样品的对比，对血浆脂肪酸定性定量。 通过对回收率和精密度的测定以及方法灵敏度的检测，检验GC-MS方法对血浆游离脂肪酸分析的效能。 结果 根据最终确定的实验条件，按脂肪酸标准品的前处理过程处理孕妇血和脐带血血浆，得到了稳定的母血和脐带血浆脂肪酸衍生化后的总离子流图，如图1和图2所示。脂肪酸四种定量离子的总离子流图如图3和4。图5为4类脂肪酸甲酯标准品质谱图. 10.00 15.00 20.00 25.00 30.00 35.00 40.00 45.00 0 1000000 2000000 3000000 4000000 5000000 6000000 7 7000000 8000000 9000000 107 1.1×107 ê±??-- ·á?è 1.2×107 4 C8:0 C10:0 C12:0 C14:0 C15:0 C16:0 C17:0 C18:0 C18:2cis C18:3n-6 C18:3n-3 C20:3n-6 C20:4n-6 C20:0 C20:5 C22:65 C20:3n-3 图1-3 母亲血浆衍生化后的总离子流图 Fig.1-3 Total ion Chromatography of maternal plasma after derivatization 图1-3 母亲血浆衍生化后的总离子流图 Fig.1-3 Total ion Chromatography of maternal plasma after derivatization 图1-3 母