第十三章基因治疗基因治疗的原理与研究概况.ppt

第十三章 基因治疗的原理 与研究进展 基因治疗分类 体细胞(somatic cell)基因治疗 生殖细胞(germline)基因治疗 只限于某一体细胞的基因的改变 只限于某个体的当代 对缺陷的生殖细胞进行矫正 当代及子代  一、基因治疗的策略 基因治疗的两种途径 Retrovirus 逆转录病毒介导的基因转移系统——由两部分组成： Retroviral packaging system AAV的特点 ● 以潜伏感染为主； ● 病毒基因组与细胞共存； ● 只要宿主细胞正常，AAV基因表达就处于抑制而维持潜伏状态； ● 若细胞受刺激，表达应激基因，AAV基因表达从而使AAV病毒复制； ● 产生子代病毒并释放，又感染新的细胞，建立新的潜伏状态。 基因干预的种类： 1.反义RNA (antisense RNA) 2.干扰RNA (RNA interference) 3.核酶 (ribozyme) 四环素抗性操纵子系统原理 四环素抗性基因的转录受Tet阻遏蛋白的负调控。 无四环素存在时，阻遏蛋白与四环素抗性操纵子序列结合阻断四环素抗性基因的表达； 四环素存在时，阻遏蛋白与四环素具有极高的亲和性，造成阻遏蛋白对四环素抗性操纵子阻遏解除，使四环素抗性基因的转录得以进行。。 基因治疗的问题与展望 治疗基因调控元件的选择； 安全高效载体的构建和转移技术的 选择； 靶细胞的选择。 HPV感染 生殖器HPV感染的潜伏期变化极大。一般来说，生殖器疣在HPV感染3~6月后显现，然而也有研究表明潜伏期有数个月甚至几十年 绝大多数的HPV感染是一过性的，新发感染大多1-2年内会发生自愈 仅有少数的HPV感染会保持潜伏性，几年或几十年后会再激活 完整的HPV感染循环 HPV感染颗粒突破下肛殖道表皮 HPV感染颗粒进入表皮细胞的基底层 随着基底层干细胞的子细胞分裂以及在垂直方向上的成熟化，病毒在基底层以上鳞状细胞中复制 成熟的病毒在表面细胞分离时释放到环境中 流行病学 HPV感染是一种普遍现象，同时由于HPV感染常常无临床症状，HPV的流行病学评估比较困难 迄今为止，我国并没有组织成规模的HPV分子流行病学调查。2008年中国疾病预防控制中心和北京市卫生局合作，首次在我国的发达城市进行大规模的HPV分子流行病学调查，初步结果分析，全人群的HPV感染率为8.6%，其中高危型HPV感染率为7.0%。 分布前3位的亚型：16、58、52 HPV核酸检测方法 通过PCR检测 灵敏，还可以鉴定特殊的HPV型别以及变异株 临床上HPV分型检测可以有效地监测HPV感染后的变化 CIN及宫颈癌治疗后，监测治疗效果 疫苗应用上，HPV分型检测是评估疫苗最有效的方案 杂交捕获2代（HC2） 适用于对于细胞学结果为ASC-US患者的分流，但不能具体分型 HPV感染的处理建议 妊娠状态 没有证据显示宫颈癌及其癌前病变由于妊娠而改变 ASC-US 除非怀疑浸润癌，在应用HPV核酸检测或反复的细胞学检测，管理方法与非妊娠女性完全一样 阴道镜检查，推荐产后6周后进行。 HSIL、AGC以及SCC的管理应该交由具有对妊娠女性进行阴道镜评估经验的临床医生进行 HPV感染的处理建议 围绝经期女性 在这一人群中的ASC-US进行HPV核酸检测会是高度有效的，这样的检测会导致相对更少的女性转至阴道镜检查 HIV感染者以及免疫抑制病例 在这一人群中，HPV感染倾向于持续感染 感染常包含多重病毒型别 在兼顾抗病毒治疗影响下的HPV筛查和管理方案还需要进一步的研究 HPV感染的关键点 鳞柱交界的概念 HPV高危型、低危型都有哪些？主要会造成哪类疾病？ HPV感染的主要检测方法 HPV感染后的处理 要 点 患者可以同时感染多个型别HPV，既往感染过某一型别HPV的个人仍可能再次获得同种型别的感染 绝大多数的HPV感染是一过性的 多数生殖道HPV感染无临床症状 90%以上特定型别的HPV的清除在2年以内 持续的HPV感染对于宫颈癌进展具有非常重要的意义 要 点 常规的HPV核酸筛查不应该面向30岁以下的女性 目前推荐在有条件的地区进行宫颈细胞学与HPV双筛查 ≧30岁妇女，细胞学未见上皮内病变和恶性细胞，HPV16，18，33，31，建议阴道镜检查 使用高危型HPV的核酸检测可对患有ASC-US的30岁或30岁以上的女性分流 CIN及宫颈癌治疗后，使用分型HPV的核酸检测可监测治疗效果 能够明确型别的HPV检测方法更有利于临床应用 宫 颈 炎 宫颈淋菌感染 以抗生素治疗为主 原则是及时、足量、规范、彻底，同时治疗性伴侣，并兼治其他性传播疾病，治疗首选头孢三代抗菌素 常同时合并