BD流式细胞仪日常维护保养.ppt

流式细胞仪日常维护及保养 BD公司 董晋 内容 日常维护保养的目的及重要性 Calibur的日常维护保养 Calibur常见故障排除 CantoII的日常维护保养 CantoII常见故障排除 日常维护保养的目的及重要性 及时规范的维护保养能够 保证流式细胞仪处于良好的工作状态。 确保得出的实验结果真实可靠。 能够大大降低仪器的故障率。 延长仪器使用寿命。 Calibur的日常维护 清洗上样针，防止加样针堵塞或有染料残留。在使用了如PI、AO等染料后，需要立即进行上样针的清洁。有时样本中含有大量蛋白成分，这些蛋白成分在上样针中会有残留，如果不能有效去除这些成分，积聚过多，会影响实验检测。这时建议在实验完成后，使用含有去蛋白成分的洗液（FACSRinse）清洗上样针。 清洗方法 准备一只上样管，加入3ml漂白剂，分别清洗外管和内管 准备另一只上样管，加入3ml蒸馏水，再次清洗上样针外管和内管 关机以后，有蒸馏水的上样管应保持原位，防止上样针有结晶形成。 Calibur的每月维护 仪器在使用一段时间后，在鞘液管路、废液管路和流动池中会有残留的碎片、污染物等，因此，需要定期清洗管路，要求至少每个月做一次，如果处理样本量很大，或经常使用附着性染料，则需要增加管路清洗频率。 清洗方法 将鞘液过滤器短路，鞘液筒中倒入1-2L 1%浓度的漂白剂。 上样管中加入3ml稀释漂白剂。冲洗半小时。 将鞘液桶中换成蒸馏水1-2L。 换上有3ml蒸馏水的上样管。冲洗半小时。 鞘液筒中换成鞘液，重新安装好鞘液滤器管路。 上样管中加入蒸馏水，RUN运行5分钟。 仪器进入STANDBY状态，可以进行样本检测。 Calibur定期维护 定期进行FACSComp质控测试，监测仪器状态。 需要定期进行仪器检查和清洁。 定期更换鞘液过滤器，以保证能有效过滤鞘液、液路正常稳定，确保仪器管路清洁。一般6个月更换一次鞘液过滤器。 上样针密封O圈会在使用中会逐渐磨损，若出现样品管卡不到上样针上或者卡的较松时，需更换此O圈。 定期清洁空气滤网，空气滤网位于鞘液筒上方，用于过滤进入激光器的空气，保持激光头清洁。可将空气滤网卸下后用水冲洗晾干后重新装入使用。 Calibur常见故障排除 在仪器出现异常情况时，可以使用CELLQuest软件中Cytometer菜单下的Status工作窗口，帮助判断错误发生情况。 Calibur常见故障排除 Status显示仪器处于Not Ready状态 检查鞘液桶及废液桶 开机需要约5分钟时间预热，等待激光功率稳定在15mw。 鞘液筒的液面检测器连接是否松动或未连接。 按下RUN键后status显示仪器为standby状态,RUN灯为橙黄色 鞘液筒是否有压力，是否漏气（盖紧鞘液筒盖）。 样本管是否有破损。 上样针上的密封O圈是否已磨损，导致样品管密封不严，更换O圈。 上样后获取不到细胞信号 检查RUN灯是否为绿色。做Prime，反冲流动室后再看信号。 重启流式仪及电脑 仪器与电脑联机故障，显示Cytometer Connection Error 检查仪器与电脑的数据连接线，重新连接数据线 重启仪器和电脑 Calibur上样针结构 更换上样针O圈 密封O圈 CantoII日常维护保养 CantoII每日关机前，准备一只加入3ml漂白剂的上样管，上样跑5分钟后做Shutdown即可。 每周做一次清洗流动室（Cleaning the Flow Cell）。 选择Clean Flow Cell程序。 根据提示，手动在上样架上放一支装约3ml有效氯浓度0.5%漂白液的试管，然后点击“OK”。 漂白液将进入流动室及上样针内进行清洗。 当清洗完毕信息出现后，点击“OK”。 约5分钟后，在上样针处放置一管蒸馏水，清洗上样针。 CantoII管路长清洗 每月做一次管路长清洗，保持液体管路清洁 清洁液路系统（Long Clean） 保证液流车中液面水平合适；倒空已满的废液桶。 确保鞘液过滤器中无气泡。 选择Cytometer Cleaning Modes Long Clean。 出现要求确认的对话框。点击“OK”继续。 清洁完成后，再用关机液清洗一遍。 完成此过程需1小时15分钟。 CantoII的定期维护 CantoII的液流车上有3个过滤器，分别用来过滤进入主机内的鞘液、DI Water和Shutdown solution，需半年更换一次。 CantoII的主机内有一个过滤器，用于过滤进入主机的所有液体，并起到去除液体中气泡，稳定液流的作用，需半年更换一次。 CantoII主机内有两个空气过滤器，用于过滤进入仪器的空气，保持管路洁净，需半年更换一次。 上样针密封O圈会在使用中会逐