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　A、K带 　B、R带 　C、B带 　D、E带 　E、N带 11、π－π＊跃迁产生的吸收带 （A） 12、n－π＊跃迁产生的吸收带 （B） A、玻璃电极 B、银－氯化银电极 C、饱和甘汞电极 D、氟电极　 E、钙电极 13、溶液pH测定的指示电极 （A） 14、溶液中F-浓度测定的指示电极 （D） 16、在测量分子荧光强度时，要在与入射光成直角的方向上进行测量，这是由于（ ） A. 只有在入射光线成直角的方向上才有荧光 B. 荧光强度比透射光强度小 C. 荧光强度比透射光强度大 D. 荧光波长比透射光波长长 E. 荧光是向各个方向发射的，为了减小透射光的影响 15、荧光分光光度计常使用的光源是（ ） A. 空心阴极灯 B. 氙灯 C. 氢灯 D. 硅碳棒 B E 17、关于荧光光谱和激发光谱，叙述错误的是（ ） A. 荧光光谱的形状与激发光的波长无关 B. 荧光光谱和激发光谱一般是对称镜像关系 C. 荧光光谱是分子的吸收光谱 D. 荧光激发光谱和紫外吸收光谱的形状相似 18、溶液温度降低通常会使荧光效率 。 19、在高浓度时荧光物质的浓度增加，荧光强度 。 20、下列化合物中，哪种物质的荧光效率最大（ ） A. 苯 B. 联苯 C. 萘 D. 芴 E.蒽 21、下列说法中正确的是（ ） A. 长共轭结构使得分子的荧光波长向短波方向移动。 B. 分子的刚性越强，荧光强度越小。 C. 给电子取代基可导致荧光增强。 D. 吸电子取代基可导致荧光增强。 * * * 本节内容小结 荧光光谱的特征 斯托克斯位移(Stokes shift) 荧光发射波长总是大于激发光波长。 荧光光谱的形状与激发波长无关 荧光光谱与激发光谱呈镜像关系 物质分子能发射荧光的两个必要条件 ?有强的紫外-可见吸收 ?荧光效率（?f）要大 有机化合物分子结构与荧光的关系 长共轭结构 共轭系统↑→ ?f ↑→?ex、 ?em↑ 分子的刚性和共平面性 共轭系统的刚性和共平面性↑→?f↑ 联苯?f=0.2 芴?f=1.0 8-羟基喹啉 8-羟基喹啉镁 1-二甲氨基萘-7-磺酸盐 1-二甲氨基萘-8-磺酸盐 ?f=0.75 ?f=0.03 位阻效应 取代基 供电子基： –NH2、-OH、-NHR、-NR2、-CN →?f ↑，F↑ 吸电子基： -NO2、-COOH、-NHCOCH3、 -C=O、-NO、-SH、-X → ?f ↓，F↓，甚至荧光熄灭 -R、-SO3H、-NH3+→对?f 无影响 一、荧光强度与物质浓度的关系 前提：ECL≤0.05 稀溶液分析法 高灵敏度 比例常数 荧光效率 激发光强度 第二节 荧光定量分析方法 溶液中荧光物质被激发后，向各个方向发射荧光，为避免干扰应该在垂直于激发光源的方向检测荧光强度 二、定量分析方法 1．标准曲线法 配成一系列标准溶液，测定这些溶液的荧光强度，以荧光强度为纵坐标，标准溶液的浓度为横坐标绘制标准曲线。 绘制时，常采用系列中某一标准溶液作为基准，将空白溶液的荧光强度读数调至0％，将该标准溶液的荧光强度读数调至100％或50％，然后测定系列中其它各个标准溶液的荧光强度。 2．比例法 3.联立方程式法 第三节 荧光分光光度计和其他荧光分析技术 一、荧光分光光度计 光源 第一 单色器 第二 单色器 激发 荧光 样品池 检测系统 荧光光度计示意图 荧光 检测器 ? 光源与检测器呈90度角，以避开激发光、杂散光的干扰，增加检测灵敏度。 I0 If It 紫外－可见 检测器 ? 分光系统(双单色器) 第一单色器作用：选择激发波长 第二单色器作用：分离出荧光发射波长 ?样品池 四面透光 荧光分光光度计与紫外分光光度计的区别 紫外-可见分光光度计 荧光分光光度计 光路 光源 仪器 校正