实验中医学生物化学方法及其在中医研究中的应用.ppt

* （三）肝和肝虚证 1．肝血虚证与能量代谢 2．肝气虚证与物质代谢 3．肝与神经内分泌 * （四）脾虚证 1．脾虚与物质代谢 脾虚患者唾液淀粉酶活性下降、血清胃泌素和胰淀粉酶活性低下，胃肠蠕动紊乱，小肠吸收功能低下。脾虚患者木糖排泄率显著降低。 检测了血清必需脂肪酸、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量、丙二醛（MDA）含量。 血清游离氨基酸（FAA）、必需氨基酸、支链氨基酸明显降低，缬、甘、苏、色、异亮、丝、丙、组氨酸等8种氨基酸含量也明显降低。头发锌，家兔骨骼肌中钾、钠、铜的含量。 * 2．脾虚证与能量代谢 脾气虚患者肌纤维的肌酸磷酸激酶（CPK）、琥珀酸脱氢酶、辅酶1-四氮唑还原酶（NADH-TR）活性、肌球蛋白腺苷三磷酸酶（M-ATPase）活性，以及肌糖原含量均减少，线粒体发生改变，骨骼肌有氧氧化效率降低，糖酵解供能途径障碍，能量代谢受阻；红细胞膜Na+-K+-ATPase活性等降低。 3．脾虚证与神经内分泌 脾气虚证患者乙酰胆碱水平明显升高、胆碱酯酶活性明显下降；还检测了患者血、尿PGE2 、PGF2α含量，血清T3水平等。 * （五）肺虚证 1．肺虚与物质代谢 肺气虚患者抗氧化能力和红细胞免疫力下降。 2．肺虚证与神经内分泌 （六）肾虚与物质代谢 1．肾虚与物质代谢 2．肾虚证与神经内分泌 （1）下丘脑-垂体-性腺轴与肾虚。 （2）下丘脑-垂体-肾上腺轴与肾虚。 （3）下丘脑-垂体-甲状腺轴与肾虚。 * （七）体质学说 1．体质学说与物质代谢 2．体质学说与能量代谢 * 三、展望 现代化的生物化学技术应用于中医药的研究，不仅会促进中医药的发展，也同时会促进生物化学的进展。 中医药的发展需要生物化学，所以中医院校的学生除系统学习中医知识外，还要学好生物化学和现代医学的检测手段，运用生物化学方法进一步阐明中医理论的精髓。只有这样，才能发挥中医优势，促进自身的发展，促进中医药事业的发展！ * 4．高效液相技术 什么是高效液相技术？ 高效液相（HPLC）技术是液相层析微量、高效化的发展。HPLC是一种高效的液相层析技术，具有高速、高压、高效、高灵敏度等特点。依据样品的性质可选择不同的色谱柱、洗脱条件、检测器（紫外、荧光、电化学、示差等），还可将被检测物流出液分类收集。 * 上图：高效液相仪 右上图：高效液相结果 左下图：色谱柱 * （四）电泳技术 电泳的原理是什么？ 带电颗粒在电场作用下，向着其电性相反方向移动的现象称为电泳。由于被分离物质各自的带电性、带电量、分子颗粒大小和形状等的不同，在同一电场下它们的移动速度各异，经过一定时间电泳后可被分离开来。 在电泳过程中，带电颗粒的迁移率在一定条件下与其所带电量、颗粒半径和溶液的黏度相关。此外还有以下因素可以影响物质的电泳迁移率：电场强度、溶液的pH值、溶液的离子强度、电渗作用等。 * 1．区带电泳 所谓区带电泳是指在电场作用下，被分离的各组分在支持物上相互分离为不同的区带。分类如下： （1）按支持物的物理性状不同可分为：① 凝胶电泳，该电泳方法使用最为普遍；② 滤纸及其他纤维纸电泳；③ 粉末电泳；④ 缘线电泳。 * （2）按支持物的装置形式不同可分为：① 平板式电泳；② 垂直板式电泳；③ 柱式电泳；④ 连续液动电泳。 （3）按pH的连续性不同可分为：① 连续pH电泳；② 非连续pH电泳。 * 左上：电泳结果 左下：垂直电泳架 右：双向电泳结果 * 凝胶成像系统 * 2．高效毛细管电泳（High Performance Capillary Electrophoresis，HPCE） 高效毛细管电泳与普通凝胶电泳的区别在哪？ HPCE是离子或荷电粒子以高压电场为驱动力，在毛细管中按其淌度或/和分配系数不同进行高效、快速分离的一种电泳技术。它具有高效（每米理论塔板数在105以上）、快速（分离时间一般小于30min）、进样体积小（一般为nl级）、灵敏度高、溶剂消耗少和抗污染能力强等特点。应用范围包括无机离子、有机分子、生物大分子如糖、核酸、多肽和蛋白质等的分析。 * 不同型号的毛细管电泳仪及其工作原理 * （五）光谱技术 什么是光谱技术？ 光谱技术是利用各种化学物质所具有的发射、吸收或散射辅射能的特性，对物质进行定性或定量的一类分析技术。它具有