显微镜使用与显微摄影技术.ppt

Microscope and microphotograhy 电子显微镜：以电子束为光源。 光学显微镜：以可见光（或紫外线）为光源。 主要内容提要 一、光学显微镜 二、显微摄影 1. 构成： ①照明系统 ②光学放大系统 ③机械装置 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像 （一）普通光学显微镜 数码摄像系统  1. 摄像头 2． 图像采集卡3． 软件4． 计算机 OLYMPUS BX51 dp70 （二）荧光显微镜 Fluorescence microscope 特点：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜； 有多个特殊的滤光片； 照明方式通常为落射式。 Fluorescence image of epithelial cell, DNA in blue and Microtubules in green 用于观察能激发出荧光的结构。用途：免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断。 （三）激光共聚焦扫描显微境 Laser confocal scanning microscope, LCSM 用激光作光源，逐点、逐行、逐面快速扫描。 能显示细胞样品的立体结构。 分辨力是普通光学显微镜的3倍。 用途类似荧光显微镜，但能扫描不同层次，形成立体图像。 laser confocal scanning microscope, LCSM （四）暗视野显微镜 dark field microscope 聚光镜中央有挡光片，照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。 可观察 4~200nm的微粒子，分辨率比普通显微镜高50倍。 把透过标本的可见光的光程差变成振幅差，从而提高了各种结构间的对比度，使各种结构变得清晰可见。在构造上，相差显微镜有不同于普通光学显微镜两个特殊之处。 1.环形光阑（annular diaphragm）：位于光源与聚光器之间 2.相位板（annular phaseplate）：物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。 （五）相差显微镜 （六）倒置显微镜 inverse microscope 物镜与照明系统颠倒，前者在载物台之下，后者在载物台之上，用于观察培养的活细胞，通常具有相差物镜，有的还具有荧光装置。 （九）当代显微镜的发展趋势 采用组合方式，集普通光镜加相差、荧光、暗视野、DIC、摄影装置于一体。 自动化与电子化。 显微操作技术micromanipulation technique 在倒置显微镜下利用显微操作器进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。显微操作器是用以控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装置。 显微操作技术包括细胞核移植、显微注射、胚胎移植以及显微切割等。 显微操作仪 普通光学显微镜的使用 /depart/shgxy/shiyan/xwjdsy.asp 数码显微镜系统操作规则 ? 1 ．打开显微镜的电源开关（背后），适当调整底座上的 亮度，调节手轮（右手侧），此时底座内灯亮。 ????2 ．按住电源开关旁边的红色按钮，打开 CCD 电源。 ????3 ．将显微镜头部上的拉杆拉出至最后一档，此时，显微 镜处于即可目视观察又可进行 CCD 摄影状态。 ????4 ．轻轻旋转显微镜头部左手侧外圈旋钮，视场中出现光 标。可通过外圈旋钮调整光标亮度。内圈手轮摆动调 整光标方向。 ????5 ．将聚光镜调至最高点，成象效果最佳。按常规操作方 法，将显微镜调整在正常工作状态。 ????6 ． 使用完毕，调节亮度手轮至最小，关掉显微镜电源。 ????7 ． 认真做好使用记录。