药物检测技术-第2章-仪器检测技术.pptVIP

包括：填充柱和毛细管柱（或开管柱） 分离系统 填充柱：多为U形或螺旋形；内径2~6mm； 长1~3m；内填固定相。 毛细管柱：分为涂壁、多孔层和涂载体开 管柱，内径0.1~0.5mm，长达几十至100m， 通常弯成直径10~30cm的螺旋状；其特点 为渗透性好、传质快，分离效率高（n可达 106）、分析速度快、样品量小。 作用对象：气化室、柱箱、检测器 控温方式：恒温和程序升温 温控系统 作用：将经色谱柱分离后顺序流出的化学组分的信息转变为便于纪录的电信号，然后对被分离物质的组成和含量进行鉴定和测量。 常用的检测器： 氢火焰离子化检测器(Flame ionized detector，FID) 热导检测器(Thermal conductivity detector，TCD) 电子捕获检测器(Electron capture detector ，ECD) 质谱检测器(MSD)即气相—质谱联用仪(GC-MS) 检测系统 主要用于可在H2-Air火焰中燃烧的有机化合物（如烃类物质）的检测。 通用型检测器 主要对含有较大电负性原子的化合物响应。它特别适合于环境样品中卤代农药和多氯联苯等微量污染物的分析。 质谱是唯一可以给出分子量, 确定分子式的方法, 而分子式的确定对化合物的结构鉴定 是至关重要的 四、高效液相色谱法(HPLC) (high performance liquid chromatography ) HPLC的概念、分类、特点及应用 HPLC系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。 根据分离机制不同，分为液固吸附色谱、液液分配色谱、化学键合色谱、离子交换色谱、分 子排阻色谱等 概念 分类 利用保留值作为定性参数； 利用在样品中加入对照品，通过峰值增高来确认； 利用LC-MS联用仪，通过被分离物的质谱图与谱 库的谱图对比来定性； 利用二极管阵列检测器给出UV光谱与对照品相比较，结合保留时间来确认。 应用 高速、高效、高灵敏度、应用广泛（GC分析只占 有机 物的20%，HPLC分析可占80%） 特点 高效液相色谱仪 输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 其工作过程如下：首先高 压泵将贮液器中流动相溶剂经 过进样器送入色谱柱，然后从 控制器的出口流出。当注入欲 分离样品时，流经进样器贮液 器的流动相将样品同时带入色 谱柱进行分离，然后依先后顺 序进入检测器，记录仪将检测 器送出的信号记录下来，由此 得到液相色谱图。 输液系统 高压输液泵：压力：150～350×105 Pa 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（10μm），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。 常用的输液泵分为恒流泵和恒压泵两种。 六通阀进样 进样系统 分离系统 分离系统的主要元件是色谱柱，它是色谱分 离过程中存放固定相的场所 。 常用检测器： 紫外-可见检测器(Ultraviolet and Visible Detector, UVD) 荧光检测器(Fluorescence Detector, DFD) 折光指数检测器(Refractive Index Detector, RID) 蒸发光散射检测器(Evaporative Light Scattering Detector, ELSD) 质谱检测器(Mass Detector, MSD) 检测系统 应用最广，对大部分有机化合物有响应 主要用于氨基酸、多环芳烃等生物制品及环境监测及 体内药物分析 适合于无紫外吸收、无电活性和不发荧光的样品的检测 通用型检测器 固定相与装柱方法的选择： 选粒径小的、分布均匀的球形固定相 （dp≤10μm） 首选化学键合相，匀浆法装柱 流动相及其流速的选择： 选粘度小、低流速的流动相——甲醇，约1ml/min 柱温的选择：选室温250C左右 HPLC法中分离条件的选择 ★ ★ ★ ②试样的制备和红外光谱的制作 被分析的试样应该是纯物质 纯物质可以通过对试祥进行分离和精制的方法(如分馏、萃取、重结晶、层析等)得到 根据试样的性质，按照试验条件制作红外光谱图 ③谱图的解析 首先观察官能团区，解析第一强吸收峰属于何种基团的特征吸收峰。 如，羰基(C=O)在1820cm-1~1600cm-1有强吸收峰，其中： 1820 cm-1 ~ 1750 cm-1 1750 cm-1 ~ 1725 cm-1 1740 cm-1 ~ 1720 cm-1 1740 cm-1 ~