红掌组织培养技术.docx

红掌的组织培养摘要：红掌常采用异花授粉，授粉方式主要借助于昆虫，种子繁殖进入开花期时间较长,如果播种繁殖, 要经人工授粉才能获得种子, 耗费人力。如果采用分株繁殖则系数较低很难满足规模化生产所需的种苗。目前, 国内对红掌需求量大, 其种苗供不应求,而组织培养技术能够快速、大量生产整齐一致的优质种苗。用组织培养快速繁殖红掌需要正确的选择具有高度分化能力的外植体，能够很快诱导外植体产生愈伤组织的培养基，适合的培养条件让生愈伤组织快速增殖和分化。关键词：红掌组织培养红掌又名安祖花、火鹤花等，属天南星科花烛属，原产于南美洲的热带雨林地区，红掌属于天南星科花烛属，多年生常绿草本植物，可常年开花。其佛焰花苞硕大肥厚具蜡质色泽, 有红、粉、白、绿、双色等。其色泽鲜艳, 肉穗花序镶金嵌玉的风姿，造形奇特, 令人神往。它那热烈、热心、热情、进取向上的意境使人油然欣喜。是目前应用范围广、经济价值高、全球发展快、需求量较大的高档热带切花和盆栽花卉。1 外植体的取材与方法1.1外植体:红掌组织培养可用叶片、叶柄、茎尖或嫩茎等作为外植体诱导愈伤组织,也可以用茎尖直接诱导芽体。同一成熟度的外植体，不同取材部位的愈伤组织诱导率各不相同，叶柄的诱导率最高，茎段的次之，而叶片的诱导率最低。叶柄对愈伤组织的诱导效果最好，诱导率最高，诱导所需的时间也最短。所以生产时常用叶柄作为外植体。1.2在晴天，取红掌幼苗刚展开的叶片，用自来水冲洗30分钟。接着在无菌条件下，用体积分数为75%的乙醇消毒30s，然后浸泡在质量浓度为1g/L 的升汞溶液中灭菌8～10min，最后用无菌水冲洗3～5次。对红掌叶片来说，这种消毒方法较好，污染率最低。2培养基的制备与灭菌：2.1培养基的制备：适合红掌愈伤组织诱导的基本培养基为MS 培养基，叶柄培养以N6、KC 和1/2MS 培养基为佳，叶片培养则以P、N6 和1/2MS 为好，适宜的激素组合及浓度配比为BA2.0mg/L+2，4-D 0.2mg/L；当激素配比为BA 2.0mg/L+NAA0.25mg/L 时能很好的诱导不定芽的发生。2.2培养基的灭菌：把制备好的培养基放置于高压灭菌锅内121℃高温灭菌25 分即可。3愈伤组织的诱导和继代培养：3.1愈伤组织的诱导：将消毒好的外植体接种于N6、KC 和1/2MS 培养基中，在温度26℃±2℃光照1500～2000Lx×12h＼d条件下培养。叶柄两端明显膨大，叶片边缘切口处出现黄色粒状愈伤组织，特别是叶柄与叶片连接处发生频率较高。红掌的愈伤组织有的组织疏松，呈黄白色，有的组织致密，呈淡绿色。经过培养疏松型的愈伤组织几乎没有分化能力，致密型的愈伤组织表面首先出现瘤状突起。3.2愈伤组织的继代培养：经过30 d 诱导培养后,形成的愈伤组织即转入分化培养基中进行不定芽分化。分化培养20 d后可见愈伤组织表面有许多深绿色瘤状小突起, 继续培养则分化成不定芽, 同时,愈伤组织也在不断增大。不定芽的分化培养基可用MS或改良MS + 1 mg /L 6 - BA + 015 mg /L NAA+ 30 g /L蔗糖+ 712 g /L琼脂。愈伤组织转入分化培养基后, 光照强度增至2000 lx, 分化率达90%左右。4 壮苗生根培养：4.1壮苗培养：在增殖培养过程中, 繁殖体会不断长出芽苗和气生根, 当增殖到一定量时, 可降低激素用量。采用MS + 012 mg /L 6- BA, 可促进芽苗长大长壮。4.2 生根培养:壮苗培养30 d 后, 当不定芽长至110~ 115 cm, 第2片、第3片完全叶形成时, 将其从基部切下, 转接于1 /2 MS + 011 mg /L IBA + 011mg /L NAA + 2 g /L活性炭+ 20 g /L 蔗糖+ 712g /L琼脂的培养基上促进根的形成, 经7~ 10 d培养,幼苗基部长出新根, 根多且粗壮, 密被白色根毛, 部分向上生长形成气生根, 此时调控光照强度为2000lx, 每天光照12 h, 培养温度为25e , 满足此条件能使幼苗长得更加粗壮, 生根率达100%。当试管苗具发达根系，有3～4片小叶时即可进行练苗移栽。5 移栽5.1 将生长健壮的生根苗,移入无直射光的地方炼苗7d打开瓶盖继续炼苗2d将经过练苗后的试管苗取出,用自来水洗净根部附着的培养基,并用1000倍液的多菌灵浸泡10min,然后放置于荫凉处,晾干叶片上的水珠,即可移栽到事先准备好的砂床上。6 后期管理6 .1 温度：控制好室温。红掌生长的最适温度为18℃---28℃，最高温度不宜超过35℃，最低温度为14℃，低于10℃随时会产生冻害的可能。夏季，当温度高于32℃时需采取降温措施，如加强通风，多喷水，适当遮荫等。冬季如室内温度低于14℃时需进行加温。6. 2 湿度：红掌生长需