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第3章 食用菌栽培的消毒灭菌
1、目的
严格区分消毒、灭菌及防腐的概念;掌握常用消毒灭菌法的原理、应用范围及使用方法。会根据对象选择合适的消毒灭菌方法。
2、重点与难点
重点:高压蒸汽灭菌
难点:冷空气的排除
3、主要内容
包括物理消毒灭菌法和化学消毒灭菌法,其中物理消毒灭菌法包括加热灭菌(干热、湿热);化学消毒灭菌法包括气雾熏蒸法和液体消毒灭菌法。
在物品及空气中分布着大量微生物。进行食用菌生产必须树立严格的无菌观念,掌握和运用消毒、灭菌技术,严防杂菌污染,保证菌种优良纯正,使食用菌顺利生长发育,以获得较好的经济效益。
消毒灭菌是排除杂菌干扰,为食用菌创造洁净生长环境的重要保证。也是食用菌生产中的一项基本技术。
4、基本概念
消毒灭菌手段分为物理、化学两种。
1)灭菌
杀死一定环境、物品中的一切微生物(包括芽孢),使一定范围内的微生物永远丧失生长繁殖能力,使之达到无菌程度,是灭菌的目的。经过灭菌的物品称“无菌物品”。灭菌可分为杀菌和溶菌。杀菌是指菌体失活,但菌形尚存。溶菌是指菌体死亡后发生溶解、消失的现象。
2)消毒:杀死环境、物品中的病原菌(杀不死芽孢),而对被消毒物品基本无害的方法为消毒。
3)防腐:暂时抑制其生长。使微生物暂时处于不生长、不繁殖、但又未死亡的状态,称为防腐。属于一种抑菌作用。
4)除菌用冲洗、过滤、离心、静电吸附等机械手段,除去微生物的方法为除菌。
消毒灭菌主要利用物理或化学因素。各种理化因子究竟能起到灭菌、消毒、防腐中的哪种效果,主要取决于本身的强度或浓度、作用时间、微生物对理化因子的敏感性及菌龄等综合因素的影响。任何消毒灭菌法的使用,必须达到既杀灭物品中的微生物,又不破坏其固有性质的目的。
第一节 物理消毒灭菌
食用菌生产中常用的物理消毒灭菌法是热力灭菌及紫外线灭菌,两者都属于强杀伤力因素。
一、热力灭菌
原理:高温使菌体蛋白质、核酸、酶等重要细胞物质发生凝固或变性失活。
日常生活中的炒、烧、烤、蒸、煮等对微生物都有一种短平快的效果。根据加热方式的不同,可分为干热灭菌和湿热灭菌两类。在实践中,可根据灭菌物品的性质和具体条件选用。
(一)干热灭菌
利用火焰、热空气杀死微生物(适于耐烧、耐烤物品),干热灭菌以其快速在灭菌领域占有一席之地,干热灭菌器灭菌范围较窄。
1、酒精灯烧接种工具、管口、瓶口→烧至红热(冷却用)简、快、彻底
2、烘烤法(热空气) 适于体积较大的玻璃、金属器皿 。
试管、培养皿、三角瓶、烧杯、吸管等包装放入烘箱→160-170℃ 、2h断电→70℃
注意:升降温勿急;勿超180℃;用时随用随开包。
干热灭菌简便易行,能保持物品干燥,但使用范围有限,只适用于空玻璃、金属器皿的灭菌,凡带有橡胶的物品和培养基,都不能进行干热灭菌。
(二)湿热灭菌
主要利用热蒸汽灭菌(适于不怕热的物品,尤其适于培养基)
热蒸汽灭菌范围广,灭菌温度低,效果好,时间短。热蒸汽穿透力大。因为蛋白质凝固点随其含水量增加而降低。
表3-1 干热灭菌与湿热灭菌穿透力的比较
加热方式
热传导介质
温度(℃)
加热时间(h)
透过布层的温度(℃)
结果
20层
40层
100层
干热
空气
130~140
4
86
72
70以下
灭菌不完全
湿热
水饱和蒸汽
105.3
3
101
101
101
灭菌完全
1、高压蒸汽灭菌在高压锅内,利用高于100℃的水蒸汽温度杀灭微生物的方法,称为高压蒸汽灭菌法。利用的是水的沸点随热蒸汽压力的增加而升高的原理。加大压力是为了提高水的沸点,单纯的压力是不能灭菌的。该灭菌法具有杀菌谱广、杀菌作用强、效果可靠、作用快速、无任何残毒、应用范围广的优点。到目前为止,尚无任何一种灭菌方法能完全替代高压蒸汽灭菌法。
高压锅是具有密闭性好、能承受一定压力的容器。因锅内的热蒸汽不能外溢,随着蒸汽压力的增加,蒸汽温度也随之提高,杀菌力也不断增强。纯蒸汽温度与其压力间有一定关系,在密闭条件下,温度随蒸汽压力的增加而升高,因此,增加压力可缩短灭菌时间。这里必须指出,高压蒸汽灭菌是蒸汽的高温使微生物死亡,而不是压力的作用。
作用时间、作用温度及饱和蒸汽等三大要素是该法灭菌的基本要素。
1)使用方法
步骤:装锅→加热排气→升压→保压灭菌→降压出锅。
排气:升压前排净锅内冷空气是灭菌成功的关键。因空气是热的不良导体,当高压锅内的压力升高后,它聚集在锅的中下部,使饱和热蒸汽难与被灭菌物品接触。此外,空气受热膨胀也产生一种压力,致使压力数值达到要求,但灭菌温度却未达到相应指标,从而导致灭菌失败。
排除冷空气的方
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