agilent高效液相色谱仪工作站学习总结.doc

Agilent1200 高效液相色谱仪工作站学习总结 开首语 本人在2008年 本人在2008年1月8日至1月11日参加广州 日至1 11日参加广州 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 化学工作站的学习培训，几天学习培训，使 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 面的了解和更多的认识，现在做个总结向大 家介绍如下。 硬件篇 安捷伦高效液相色谱仪1200由几部分 组成，脱气机，泵、进样器、柱温箱和检测器。 安捷伦1200HPLC系统采用积木式堆积结构，方 便用户按照自己的需要配置不同的的系统，整 个系统的流路自上而下设计、连接，减小了系 统的死体积和延迟体积。 Agilent 1200HPLC系统堆叠方式 脱气机 安捷伦1200系列在线脱气机有，微量真空 脱气机G1379B、标准真空脱气机G1322A。原理 基本相同，就是使用半透膜管路，允许气体分 子通过，液体分子无法通过。A型用的是微渗 管，B型用的是滤膜。流路A型是左进右出，而 B型为下进上出，本科室使用的为A型G1322A。 使用真空脱气机可以降低噪声，保证保留时间 的重现性，与He脱气相比，更方便，更节省费 用。 真空脱气机脱气原理 泵 安捷伦1200系列泵有： 单元泵：G1310A、 四元泵：G1311A、 二元泵：G1312A、 二元泵SL型：G1212B。 单独一个泵腔 泵腔无法满足溶剂传输系统的要 泵腔 求：连续性、稳定性都不符合标准，现在新购 仪器中已很少考虑。 单元泵，按溶剂的传输系统有两种，一种是并 联柱塞泵，另一种是串连柱塞泵。并联柱塞泵 由于两个泵的相位不同，可以补偿流量脉冲， 但由于单向阀的数量增多，所以容易造成泄漏， 增加了维护使用的难度。串连柱塞泵左泵腔的 活塞运动速度为右泵腔活塞的2倍，因此，相同 时间内，左泵提供的流量为右泵的两倍，左泵 提供的溶剂一半直接供给系统，另一半被右泵 吸入，稍后供给液相系统，减少了单向阀的用 量，可以使用压缩因子补偿。 四元泵，其实就是比单元泵多了四元比例阀。 由单元泵可以升级到四元泵，除了要加上四元 比例阀外，还要更换主板。需要注意的是，当 使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到 四元比例阀下面的通道上，有机溶剂接到上面 的通道上。如果经常使用盐溶液，建议定期用 水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐 沉淀。 四元泵的工作原理 二元泵，有两个泵头，特点是高压混合，无需 脱气；对于有强紫外吸收的流动相，使用静态 混合器可以降低基线噪声；可以选择溶剂切换 阀自动进行溶剂切换；对于高盐流动相，可选 择泵头密封垫清洗装置。所以脱气机不是标准 配置，但增加真空脱气机，流量范围可以从 0.5～5ml/min扩展至0.05～5ml/min；加入静态 混合器，使流动相混合更加均匀；如果配置 溶剂切换阀，则两个泵头可分别控制两种溶剂， 类似四元比例阀，但并不完全一样，只能同时 混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。 二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高， 而且由于为高压混合，产生的气泡也更少，所 以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵， 流速稳定性相对较差，低压混合容易产生气泡， 在实验中常会遇到这样的问题，多元 混合中出现流动相不稳定的现象，特别是流动 相配比较低的如小于1%，其多元混合效果难以 达到我们的要求，造成保留时间漂移，甚至得 不到我们预期的色谱峰。明白四元泵的低压混 合的道理，实际操作中我们发现问题时，有助 于我们对原因的分析。 必要时泵可以拆御，更换密封垫及滤芯。 对容易出故障部位及处理方法，比如宝石 活塞杆是不能超声的部件，泵头密封垫要成对 更换，实验室中至少应备有一付 号泵头密封 室中至少应备有一付4号泵头密封 室中至少应备有一付 垫，部件号为：5663-6589（用于反相色谱）； 部件号为： （用于反相色谱）； 0905-1420（用于正相色谱）。同时实验室应备 （用于正相色谱）。同时实验室应备 ）。 过滤芯， 有5-10个PTFE过滤芯，以备日常所需。判断方 个 过滤芯 以备日常所需。 法为，打开冲洗阀，以水为溶剂， 法为，打开冲洗阀，以水为溶剂，流速 5ml/min，系统压力大于10bar就应更换过滤白 ，系统压力大于 就应更换过滤白 头了。 头了。 二元泵的工作原理 进样器，安捷伦1200系列进样器有： 标准自动进样器G1329A、 高性能进样器G1367A、 高性能进样器SL型G1367B、 手动进样器G1328B。 自动进样器的特殊功能，洗针功能可以把 样品残留降低到最小限度；多次吸液用于进样 量大于100μl的情况；程序进样可以非常灵活 地执行用户的进样程