ilc2细胞在过敏性鼻炎小鼠模型中的表达及机制研究word论文.docxVIP

中英文缩略词表英文缩写ILC英文名称innatelymphocytecell中文名称固有淋巴细胞OVAovalbumin卵清蛋白ARallergicrhinitis过敏性鼻炎EDTAethylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸ILinterleukin白细胞介素RNAribonucleicacid核糖核酸PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液GAPDHglyceraldehyde3-phosphatedehydrogenase三磷酸甘油醛脱氢酶RT-PCRreverse-transcriptionpolymerasechainreaction逆转录聚合酶链式反应ODopticaldensity光密度DEPCdiethylpyrocarbonate二乙基焦磷酰胺ELISAenzyme-linkedimmunosorbentassay酶联免疫吸附测定TSLPthymicstromallymphopoietin胸腺基质淋巴生成素IgEimmunoglobulinE免疫球蛋白E中文摘要研究目的：通过对小鼠过敏性鼻炎模型鼻粘膜中ILC2细胞及其相关的细胞表面分子转录因子的检测，观察ILC2细胞在过敏性鼻炎动物模型鼻粘膜中是否表达以及探究其在过敏性鼻炎发病机制中起的作用，以便于为过敏性鼻炎的治疗提供一个新的靶点。研究方法：BALB/c小鼠40只，雌性，SPF级，鼠龄6周，体重10-15g，随机分为4组：Control组、OVA+SR1001组、OVA组、OVA+IL-25+IL-33组。卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）作为致敏剂，氢氧化铝作为佐剂，采用腹腔注射联合鼻腔滴注的方法建立过敏性鼻炎小鼠模型。对于OVA+SR1001组、OVA+IL-25+IL-33组小鼠，从第22天至29 天鼻腔激发前2小时事先鼻腔滴注SR1001溶液或IL-25/IL-33溶液，其余致敏方法一致。免疫荧光双染技术检测各组动物鼻粘膜中ILC2细胞的表达，实时定量PCR 方法检测各组动物鼻粘膜中ILC2细胞相关因子RORα、Thy-1、ST2、CD90、CD117、CD127 和Ly6a的基因表达水平，酶联免疫吸附技术检测各组动物血清中IgE、IL-4、IL-5和IL-13的表达水平。研究结果：Control组、OVA+SR1001组、OVA组三组动物中免疫荧光双染ILC2细胞数目依次增加，结果有统计学差异，但是OVA+IL-25+IL-33组与OVA+SR1001组、OVA组相比结果无明显统计学差异。RT-PCR检测四组动物中RORα、Thy-1、ST2、CD90、CD117、CD127和Ly6a 的基因表达水平，结果显示RORα、Thy-1、ST2、CD90、CD117指标表达水平有统计学差异，而CD127和Ly6a未检测到明显表达差异。Control组、OVA+SR1001组和OVA组小鼠血清中IgE水平依次升高，且有统计学差异，OVA+IL-25+IL-33组小鼠血清IgE水平高于OVA组，但无统计学差异。OVA+SR1001组、OVA组和OVA+IL-25+IL-33组动物血清IL-4和IL-5水平高于Control 组，结果有统计学意义，但是三组之间无明显差异。动物血清IL-13水平在Control 组、OVA+SR1001组、OVA组、OVA+IL-25+IL-33组依次升高，且结果有统计学差异。2结论：1、Control组、OVA+SR1001组和OVA组小鼠血清中IgE水平依次升高，ILC2 细胞数目同样依次增加，提示ILC2细胞参与过敏性鼻炎的发病过程，且ILC2细胞数目可作为衡量过敏性鼻炎严重程度的一个重要指标。2、ILC2细胞可能是体内合成分泌IL-13的主要细胞，而非是合成分泌IL-4和IL-5的主要细胞。3、ILC2细胞表达与RORα、Thy-1、ST2、CD90、CD117指标表达水平有关，提示RORα、Thy-1、ST2、CD90、CD117是与ILC2细胞功能有关的主要分子。关键词：过敏性鼻炎小鼠模型ILC2白介素免疫球蛋白EAbstractObjective:WedetectednasalmucosaILC2cellsanditsassociatedcellsurfacemoleculesand transcriptionfactorsinthemousemodelofallergicrhinitis,toelucidatewhetherthe expressionofILC2cellsinthenasalmucosaanditsroleinthepathogenesisinthemouse modelofallergicrhinitisinordertoprovid