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GM１对EAE大鼠轴索损伤的保护作用摘要目的观察单唾液酸四己糖神经节苷酯（Monosialotetrahexosylganglioside，GM1）对实验性自身免疫性脑脊髓炎（ExperimentalAutoimmuneEncephalomyelitis，EAE）大鼠的脊髓中趋化因子CXCL1（CXCchemokineligand1）及神经丝蛋白（Neurofilamentprotein，NF）的表达影响，探讨GM1对EAE大鼠模型是否具有保护作用，从而为临床治疗MS 提供新的思路和实验依据。方法72只成年雌性Wistar大鼠随机分为：正常对照组、EAE组、EAE+大剂量GM1组、EAE+小剂量GM1组（n＝18）。正常对照组注射生理盐水，其它各组采用自制完全抗原诱导EAE模型。EAE组建模后不作处理，EAE+大剂量GM1 组、EAE+小剂量GM1组分别于建模后给予GM1100mg/kg.d、40mg/kg.d。比较各组发病率并行神经功能缺损评分，取脊髓行Bielschowsky银染色、CXCL1、NF免疫组织化学染色观察。结果1.各组实验大鼠发病率：正常组大鼠无发病；EAE组发病率为83.33%；GM1 干预组发病率较EAE组明显降低（P0.05），而大剂量GM1干预组发病率较小剂量GM1干预组低（P0.05）。2.神经行为评分：经免疫诱导后第7 天、第14 天、第21 天分别予以评分，在第14 天、第21 天，GM1干预组评分较EAE 组低；第14 天大剂量GM1干预组评分低于小剂量GM1干预组；从三个时间点进行比较，7 天组、21 天组与14 天组比较差异具有统计学意义（P0.05），而7天组与21 天组比较差异无统计学意义（P0.05）。3.组织病理学观察：Bielschowsky银染色结果示正常对照组轴索大多数走行方向一致，粗细均匀，轴索的连续性完好。余各组不同程度出现轴索改变，包括轴索粗细不均、肿胀、畸形，部分出现空泡状淡染，有的甚至出现断裂，部分形成收缩球。24.免疫组织化学染色：4.1 脊髓组织中CXCL1 表达：除正常组外，其余三组均有CXCL1 阳性表达，各组CXCL1阳性细胞数比较：正常组未见CXCL1阳性细胞；与正常组相比，EAE组CXCL1 表达较同期明显增多，而经GM1干预后，CXCL1表达量有所减少，其中大剂量GM1 组CXCL1 表达量低于同期小剂量GM1组，差异均有显著性（P0.05）。从三个时间点进行比较，第14天，大剂量GM1组CXCL1阳性细胞数低于小剂量GM1组；7天组、21天组与14天组相比较，差异具有统计学意义（P0.05），而7 天组与21 天组相比差异无统计学意义（P0.05）。4.2 脊髓组织中NF表达：结果示4 组均有NF阳性表达。NF阳性细胞数比较：正常组NF表达量最多；EAE组NF表达较同期正常组明显减少，而经GM1 干预后NF表达量有所增加，其中大剂量GM1组NF表达量高于同期小剂量GM1 组，差异均有显著性（P0.05），各组三个时间点比较，第14天，大剂量GM1 组NF阳性细胞数高于小剂量GM1组；7 天组、21 天组与14 天组相比较，差异具有统计学意义（P0.05），而7 天组与21 天组比较差异无统计学意义（P0.05）。结论1.EAE大鼠脊髓组织中存在CXCL1及NF的表达且与动物发病有关，GM1 干预对各指标有一定影响。2.GM1对EAE大鼠具有保护作用，可以改善EAE大鼠临床症状，发挥的效应与剂量有关。关键词：多发性硬化；实验性自身免疫性脑脊髓炎；轴索损伤；单唾液酸四己糖神经节苷酯；趋化因子CXCL1；神经丝蛋白硕士研究生：汤晓春导师：魏麓云3Theprotectiveeffectof Monosialotetrahexosylgangliosideonaxonalinjuryin the ExperimentalAutoimmuneEncephalomyelitisofratsAbstractObjective:ByMonosialotetrahexosylganglioside(GM1)ontheinterventionofExperimental AutoimmuneEncephalomyelitis(EAE)inratstoobservethecorrespondingchanges in the expression of CXC chemokineligand 1(CXCL1)and Neurofilamentprotein(NF) inthespinalcord,understandingwhetherGM1haveaprotectiveeffectforMSandits mechanism,and thus for clinical t