第6章沉淀反应-安徽理工大学.PDFVIP

安徽理工大学医学院 S c h o o l o f M e d i c i n e 教案首页 次课 授课时间 年 月 日 教案完成时间： 年 月 日 课程名称 免疫学检验 年 级 专业、层次 医学检验 （本科） 专业技术 授课方式 教 师 许礼发 大 学时 3 职 务 （大、小） 授课题目 （章、节） 第六章 沉淀反应 基本教材或主要参考书 教学目的和要求： 1、掌握单向扩散试验、双向扩散试验原理与方法； 2 、熟悉液体内沉淀试验 (絮状沉淀试验、环状沉淀试验) ；掌握单向扩散试验、双向扩散试验、免疫电泳、火箭免疫电 泳；熟悉对流免疫电泳、免疫固定电泳； 3、了解免疫浊度法 (免疫速率散 浊度测定法 ) 的原理。 大体内容与时间安排，教学方法： 第一节 沉淀反应的特点 0.5 学时 第二节 液体内沉淀试验 0.5 学时 第三节 凝胶内沉淀试验 2 学时 教学重点、难点： 重点：单向扩散试验、双向扩散试验、免疫电泳、火箭免疫电泳；熟悉对流免疫电泳、免疫固定电泳； 难点：对流免疫电泳、免疫固定电泳 教研室审阅意见： （教研室主任签名） 年 月 日 （教案续页） 辅助手段和时间 基 本 内 容 分 配 备 注 沉淀反应(precipitation)是可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特 异性结合出现的沉淀现象。沉淀反应是免疫学标记技术的基础，也是近代 自动免疫检测技术的核心技术。 第一节 沉淀反应的特点 沉淀反应的特性同经典的抗原抗体反应，但沉淀反应中的抗原多为蛋 白质、多糖等可溶性物质。沉淀反应可分为两个阶段。①抗原抗体特异结 合反应，在几秒钟到几十秒钟内完成，出现可溶性小分子复合物，快而短， 但不可见。测定该阶段免疫复合物形成的速率称速率比浊；②而后形成大 的可见的免疫复合物，约需几十分钟到数小时才能完成， 沉淀环、沉淀 线。在免疫比浊测定中，测定经过一定时间后形成免疫复合物的量称终点 比浊法。 第二节 液体内沉淀试验 一、絮状沉淀试验 抗原抗体溶液在电解质的存在下出现絮状沉淀物。该法受抗原抗体比 例直接影响，产生两种最置比例基本测定法。 (一)抗原稀释法 稀释一系列可溶性抗原与恒定抗血清混合。37℃反应后产生的沉淀物 随抗原量的变化而不同，出最适比。 (二)抗体稀释法 恒定抗原量与不同程度的稀释抗体反应，找出抗体结合的最适比价。 二、免疫浊度测定 是现代自动化光学检测系统应用于沉淀反应，对液体中的微量抗原、 抗体、药物及小分子半抗原进行定量检测。 (一)分类 根据方法学应用分为透射比浊法(transmission turbidimetry)、散 比浊法(nephelometry)、免疫乳胶比浊法(immunolatex turbidimetry)。 免疫比浊测定又可分为速率比浊法和终点比浊法两种。 (二)比浊测定的影响因素 1．抗原抗体的比例 是浊度形成的关键因素。经