第八章 ppt 农业技术.ppt

生长调节剂可能是起一种诱变剂的作用。 不同的激素浓度可以有选择地诱导不同倍性的细胞的分裂。 激素除了引起染色体倍性的增加外，在一些培养中还发现染色体倍性减少的现象。 2.植物生长调节剂 * （四）继代培养时间 继代时间越长，继代次数越多，细胞变异的几率就越高。长时间的继代培养会使愈伤组织和细胞的再生能力降低甚至完全丧失。 * * 五、 植物体细胞无性系变异的机理 植物体细胞无性系变异形成的机理，一直是无性系变异研究所关注的焦点。但由于高等植物突变体再生可育植株较难，所以虽然有关变异体的报道较多，但明确的遗传分析却不多。 * （一）预先存在的变异表达 1.多细胞外植体：指来源于不同组织、染色体倍性存在差异的细胞，如韧皮部、木质部和薄壁细胞。 2.嵌合体：构成组织的细胞遗传背景不同，或者是分生组织中含有变异细胞，故组织培养中的嵌合体能够产生高频率的突变体。 * 组织培养中产生非整倍体的原因有： 1.多级纺锤体的出现——染色体不均等分离，造成染色体数目变异 2.染色体不分离或滞后——形成染色体多于母体细胞的超倍体细胞和亚倍体细胞 3.核裂——导致双核，核裂频率高的材料，多倍体、亚多倍体和非整倍体出现的频率也高 （二）染色体数目变化 * * 福建农林大学园艺植物生物工程研究所 第八章 植物体细胞无性系变异 遗传变异是作物品种改良的重要基础。由于现有种质资源库不断萎缩，作物遗传育种的可持续发展已成为现代遗传学家和育种学家关注的焦点。生物技术的发展为保存现有资源、创造新的遗传变异提供了新的手段。 * 细胞组织的离体培养属于无性繁殖范畴。从理论上来说，无论是细胞还是组织培养，再生的个体均承传了母体的遗传基础，这也是离体培养技术作为植物快速繁殖应用的基础。 * 体细胞中存在广泛的异质性,在整体中被掩盖起来,无法表现出来。采用常规方法也难以把其分离出来。在离体培养中,变异细胞可高频率地表现出来,人们只要加以一定的分离和选择,就可以利用变异系进行品种改良。 * 第一节 植物体细胞无性系变异概念及筛选 体细胞无性系（somaclones）：Larkin Scowcroft（1981）提出把由任何形式的细胞培养所产生的植株统称。 体细胞无性系变异：指培养物在培养阶段发生变异，进而导致再生植株亦发生遗传改变的现象。 体细胞无性系变异育种 ：指体细胞无性系发生的可遗传的变异经人工选择和培育，能获得既具有亲本原来的优良性状，又带来某一些新性状的新品种。 一、概念 * 1、体细胞产生的变异具有以下几个优点： ①适用于各种可进行组织培养的作物； ②持续快速提供变异源； ③消除优良品种的一个或几个缺陷； ④提供新型变异株系。 二、体细胞无性系变异的优缺点 * 起始材料的选择 突变体筛选 细胞诱变 自发变异 突变体稳定性鉴定 步骤： * 要求： 其一，目标性状的可行性。 其二，必需充分考虑试验植物的细胞培养技术水平。 其三，适当的细胞类型亦是提高体细胞突变系筛选效率的重要条件。 1．起始材料的选择 * * （1）外植体 离体下诱导 愈伤组织 继代培养小细胞团或单细胞悬浮培养物 筛选 突变体 （2）器官或细胞培养物 分离 单个的原生质体 筛选 突变体 * 起始材料 （1）自发变异 离体培养的植物细胞会出现较高频率的自发变异，离体培养中体细胞自发突变所产生的变异往往比较稳定，没有人工诱变的后续干扰，有利于分离和选择。 2.培养细胞的变异 * （2）诱变变异 A.物理诱变 B.化学诱变 C.复合因子诱变 D.转座子插入诱变 * （1）培养细胞的种类 最常用的材料是原生质体和悬浮培养的细胞。利用原生质体产生的突变体相对有利。因为是单细胞，易被选择剂选择，避免获得嵌合体式的突变体。 3.突变细胞的选择 * （2）突变细胞的选择方法 a 直接选择法：给定选择条件，使新的突变表现型优先生长，直接筛选出对这些物质具有抗性的突变细胞。又分为正选择和负选择。 b 间接选择法：借助与突变表型有某种相关的特性作为间接选择指标的筛选方法，当缺乏直接可供选择的表型指标或在选择所需表现型的直接选择条件对细胞不利时可采用。 * 需要鉴定的原因：并非所有能够生长的细胞均为突变细胞：有的细胞没和选择剂接触，有的只是外遗传变异. 鉴别方法：将选择出来的细胞或组织置于正常培养基上继代培养几次，如仍能表现出所选择的目标性状，即可确定为突变细胞或组织。 4.突变性状的遗传基础及其稳定性鉴定 * 外植体的类型、生理状态等因素明显影响体细胞无性系变异的频率。一般而言，培养特异化程度高或衰老的组织，产生变异的几率大；而