阿立哌唑微生物限度检查法验证方案.doc

阿立哌唑微生物限度检查法验证方案 文件编码 HD1109·010-00-2 Copy № 安装位置 房间号 起草人 日期 验证小组会签 项目负责人： 验证管理员： QC室主任： QA室主任： 设备动力室主任： 质量部经理： 日期： 日期： 日期： 日期： 日期： 日期： 验证记载 批准日期 执行日期 00 分发单位 1 主题内容 本方案规定了阿立哌唑微生物限度检查细菌、霉菌及酵母菌计数方法和控制菌检查方法的验 证。 适用范围：本方案适用于阿立哌唑微生物限度检查。 职责 项目负责人：负责起草验证方案及实施，并对实验数据结果准确性负责。 验证管理员：起草验证方案，负责验证协调工作，收集验证资料、数据并出具验证报告。 QC室主任：负责审核验证方案，并监督验证方案实施。 QA主任： 负责审核验证方案。 质量部经理：负责验证方案的批准。 概述 根据《中华人民共和国药典》2010版的规定，阿立哌唑需进行细菌数、霉菌和酵母菌数及控制菌的测定，为保证检验结果的准确可靠，特制定本方案对阿立哌唑的微生物限度检查方法进行验证。根据《中国药典》2010年版一部附录XⅢC“微生物限度检查法”指导，《验证管理规程》、《阿立哌唑质量标准》、《微生物限度检查SOP》，对阿立哌唑的微生物限度检查方法进行验证。 验证目的： 通过阿立哌唑微生物限度方法的验证，确保所采用的微生物限度检查方法适合于阿立哌唑的微生物限度检查，确保检验在结果的准确可靠。 验证内容： 细菌、霉菌及酵母菌计数方法、控制菌检查方法 供试液的制备 --细菌（试验组、菌液组、供试品对照组、稀释剂对照组） --霉菌和酵母菌（试验组、菌液组、供试品对照组、稀释剂对照组） --控制菌检查方法（菌液制备、供试液对照组、试验组、阴性菌对照组、阴性对照组） 6.1 菌种 验证试验所用的菌株传代次数不得超过5代（从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0 代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株的生物学特征。 大肠埃希菌 （Escherichia coli） 〔CMCC（B）44 102〕 金黄色葡萄球菌 （Staphylococcus aureus） 〔CMCC（B）26 003〕 枯草芽孢杆菌 （Bacillus subtilis） 〔CMCC（B）63 501〕 白色念珠菌 （Candida albicans） 〔CMCC（F）98 001〕 黑曲霉 （Asprgillus niger） 〔CMCC（F）98 003〕 6.2 菌液制备 （见附表一） 6.2.1 分别接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，经30～35℃培养18～24小时。取营养肉汤培养液1ml加入0.9%无菌氯化钠溶液9ml, 分别制成10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8菌悬液，再分别取各稀释级的菌悬液1ml, 注入平皿中,倾注营养琼脂培养基, 摇匀，凝固,经30～35℃培养18～24h,取出计数。每种菌种各稀释级平行制备2个平皿。取计数范围在50～100cfu菌悬液为验证时的使用菌液。 6.2.2 接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中，经23～28℃培养24～48小时，取改良马丁培养物1ml加入0.9%无菌氯化钠溶液9ml, 10倍递增稀释至每1ml含菌数为50～100cfu的菌悬液为验证时的使用菌液。 6.2.3 接种黑曲霉菌液时,