微型月季的离体培养与快速繁殖.doc

微型月季的离体培养与快速繁殖 ` 摘要 通过对微型月季离体生长过程的观测，研究了植物激素对微型月季不定芽增殖、伸长以及壮苗、生根的作用，并筛选出了微型月季快速繁殖不同生长阶段的适宜培养基。结果表明，增殖培养基以MS+BA 1.0+NAA 0.2较好.壮苗培养基以MS+BA 0.4+NAA 0.01较好.生根培养基以1/2MS较好。季节对移栽成活率的影响极大,组培苗的根长、数目也有一定的影响。 关键词 微型月季；离体培养；快速繁殖 杂种香水月季（含切花月季）[1]、微型月季[2,3]、丰花月季[4]的离体培养与快速繁殖已有许多研究报道，主要涉及启动培养、继代培养、生根培养及移栽成活率的影响因素等几个方面。微型月季小巧玲珑，花色丰富，有香味，是案头摆设之佳品，市场需求越来越大。朱建镛等人研究了微型月季腋芽发芽率，茎段放置方法对新生腋芽鲜重与干重的影响，不同光强对新梢生长进程的影响，不同品种增殖率的差别以及不同培养基对增殖进程的影响[2]。洪立萍等人进行了微型月季离体快速繁殖的研究[3]。为了满足人们的需求，近年引入了不少国外微型月季的新品种。为了这些优良品种的快速繁育，中国农业大学观赏园艺系观赏植物遗传育种与生物技术实验室从1999年1月，开始进行了微型月季离体培养与快速繁殖的试验，重点研究植物激素对微型月季离体生长进程的影响，快速繁殖不同阶段的适宜培养基及影响移栽成活率的因素。 1 材料与方法 1.1 试验材料 材料取自北京莱太花卉市场的微型月季商品盆花。首先将整段枝条用洗衣粉水仔细刷洗，滤纸吸干，剪成2—3cm长的节段；然后在超净工作台上用70%的酒精浸泡30S，接着放入0.1%HgCL2溶液中浸泡10min，最后用无菌水冲洗6次以上；最后在无菌条件下切割成单芽茎段，接种于芽启动培养基上。 1.2培养基及其配制 培养基中的各种成分（表1）分别用蒸馏水配成一定浓度的母液，按比例混合后，分装于100ml三角瓶中，每瓶装25-30ml，用耐高温塑料膜封口。培养基中一般含绵白糖3%，琼脂0.6%，pH值为5.8-6.2。1.3-1.5大气压下灭菌20-25min，取出放于无菌室中待用。 表1 微型月季离体培养不同阶段的培养基配方 阶段 No. 基本 培养基 细胞 分裂素 生长素 阶段 No. 基本 培养基 细胞 分裂素 生长素 启动 1 MS BA 5.0 IBA0.1 CK 1* MS MS BA 1.0 NAA0.4 2 MS BA 10.0 NAA 1.0 1 MS BA 1.0 IAA0.2 2* MS BA 1.0 NAA1.0 2 MS BA 1.0 NAA1.0 3 1/4 MS NAA0.5 增 3 MS BA 2.0 IAA0.2 4 1/2 MS NAA1.0 殖 4* MS BA 1.0 NAA1.0+ IAA0.4 生 5 1/2 MS NAA0.75 培 5* MS BA 1.0 NAA1.0 根 6 1/2 MS NAA0.5 养 6 MS BA 2.0 IBA0.3 + GA310 培 7 1/2 MS NAA0.1 基 7 MS KT 3.0 NAA0.5 养 8 1/2 MS NAA0.03 8 MS KT 1.0 NAA0.2 基 9* 1/2 MS NAA1.0 壮苗 1 MS BA 0.5 NAA0.1 10 11 1/2 MS 1/2 MS IBA1.5 IBA1.0 2 MS BA 0.5 NAA0.05 培 3 MS BA 0.5 NAA0.01 12 MS NAA0.5 养 4 MS BA 0.4 NAA0.01 13 MS NAA0.1 基 5 MS BA 0.3 NAA0.01 14 MS NAA0.03 *含活性炭1% 1.3 接种、培养、驯化与移栽 把启动培养的腋芽切割下来，每瓶一枚，直插于增殖培养基中。把增殖的丛生芽从基部切开，置于壮苗培养基上，使单芽伸长、增粗。再将形成主茎的壮苗插入生根培养基中；弱苗可在增殖培养基中继代培养。培养室温度25(2(C，每天用荧光灯照明12小时，照度为2000Lux。 将诱导发根后的微型月季无菌苗先炼苗7天。第三天拆封口线，第五天拆封口，第七天取出试管苗，先洗掉基部培养基，细心移栽到苗盘中，基质为珍珠岩和菜园土，按1：1的比率配置。开始用1/2MS培养液浇灌，约1个月。移栽温度以20-25为好，湿度最好大于85%，中午避免阳光直晒。 1.4观测与分析 在离体培养过程中，主要观测并分析了以下数据： 增殖率=(第二次继代增殖率R2-第一次继代增殖率R1)/R1，增加高度=第二次观测高度H2-第一次观测高度H1，生根率=生根总株数/接种总株