实验小鼠痘病毒感染检测分析.doc

 实验小鼠痘病毒感染检测分析 应贤平 钱 琴 屈霞琴 姜文琴 潘振业 ( 卫生部上海生物制品研究所 ,上海 200051) 【摘要】 小鼠痘病毒急性感染可导致实验小鼠脱脚病 (鼠痘) 发作 ,临床症状明显 ,发病动物短 期内大量死亡 。近 10 年某地区鼠痘发生次数依次为昆明小鼠 (7 次) 、NIH 小鼠 (3 次) 、ICR 小鼠 (2 次) 和 BABLΠc 小鼠 (1 次) 。无明显临床症状慢性持续性感染 ( 隐性感染) ,是病毒传播或转化成急 性感染主要原因 ,用免疫荧光技术 ( IFA) 可检测到病毒抗体 ,鸡胚病毒培养意义不大 。流行病学调 查证实 IFA 抗体阳性小鼠群体脱脚病发病率显著高于 IFA 抗体阴性小鼠群体 ( P 01001) 。 【关键词】 小鼠 ; 鼠脱脚病 ; 感染性 ; 免疫荧光技术 Analysis of Ectromelia ( Mousepox) Virus Infection in La boratory Mice YING Xianping ,QIAN Qin ,QU Xiaqin ,et al1 ( Shanghai Institute of Biological Products ,Shanghai 200051 ,China) 【Abstract】 There were found Mousepox Virus (MPV) acute or chronic infection in laboratory mice . Sev2 en ,three ,two and one acute infection of MPV occurred in Kunming ,NIH , ICR and BALBΠc mice respectively in near 10 years. MPV chronic persistent infection was demonstrated by immunofluorescence assay( IFA) . Both ret2 rospective and prospective epidemiological surveys confirmed that IFA positive was related to outbreak of Ec2 tromelia . IFA should be applied for monitoring chronic persistent infection of MPV in mice . 【 Key words】 mice ; ectromelia ; infections ; immunofluorescence assay( IFA) 素2 小 鼠 痘 病 毒 感 染 有 急 性 和 慢 性 二 种 形 式 ,常见实验小鼠烈性传染性脱脚病就是由 小鼠痘病毒急性感染引起的1 ,通常也称作 为鼠痘 。故 把 小 鼠 痘 病 毒 称 为 脱 脚 病 病 毒 ( Ectromelia Virus) 或 鼠 痘 病 毒 (Mousepos Vir2 us) 。慢性感染中主要为持续性感染 ,鼠痘病 毒慢性持续性感染小鼠没有明显临床症状 , 是诱 发 脱 脚 病 或 产 生 病 毒 传 染 的 主 要 因 。因此对实验小鼠慢性持续性鼠痘病毒 感染诊断对控制鼠痘病毒蔓延 ,防止脱脚病 发生具有积极意义 。我们总结近 10 年来某 地区 11 个单位实验小鼠鼠痘病毒感染检测 结果 ,初步分析鼠痘病毒慢性持续性感染免 疫荧光技术 ( IFA) 诊断方法具有较高灵敏性 和可靠性 ,为控制和预防脱脚病发生积累经 验 。 1 材料与方法 作者简介 :应贤平 ,男 ,硕士 ,副研究员 ,研究方向 :实验 动物病毒学 把 1 ml 含 10 - 3 PFU 111 病 毒 抗 原 制 备 Lister 株 痘 苗 病 毒 接 种 到 单 层 致 密 Vero 细 胞 ,37 ℃吸附 2 h 后 , 加 10 ml 含 1 %牛 血 清 MEM 细胞维持液 ,37 ℃培养 3 d ,细胞出现明 显病变 、脱落 。按正常细胞与病毒感染细胞 1∶2 比例混合配制成 107 细胞Πml ,滴加在圈 有 26 孔玻片上 ,空气干燥后丙酮液固定 ,用 已知阳性血清测定抗原效价后 , - 80 ℃保存 待用 。 112 血清病毒抗体检测 待查小鼠血清来自抽检和送检的普通级 动物 ,阳性血清为自然暴发鼠痘 ( 脱脚病) 小 鼠群体中筛选得到的 , 阴性血清为本所 SPF 级小鼠血清 。待检血清按系列倍比稀释 ,加 到已感 染 痘 苗 病 毒 Vero 细 胞 吹 干 玻 片 上 , 37 ℃湿温保