蛋白质化学(上).ppt

谷胱甘肽的生物功能 解毒作用：与毒物或药物结合，消除其毒性作用； 参与氧化还原反应：作为重要的还原剂，参与体内多种氧化还原反应； 保护巯基酶的活性：使巯基酶的活性基团-SH维持还原状态； 维持红细胞膜结构的稳定：消除氧化剂对红细胞膜结构的破坏 三、天然活性肽—抗菌肽 短杆菌肽：破坏细菌细胞膜 青霉素：阻碍细菌细胞壁的合成 三、天然活性肽—激素肽 第五节 蛋白质的分类 分 类 结构蛋白 功能蛋白 活性蛋白 信息蛋白 纤维状蛋白 球状蛋白 单纯蛋白质 清蛋白：溶于水 球蛋白：微溶于水，溶于稀盐溶液 谷蛋白：不溶于水，溶于稀酸稀碱，不溶于70％乙醇； 醇溶蛋白：不溶于水，溶于稀酸稀碱，溶于70％乙醇； 角蛋白 结合蛋白质 核蛋白、糖蛋白、脂蛋白 待续……. 四、氨基酸的化学反应 与茚三酮反应 与甲醛反应 与DNFB反应 与PITC反应 成盐成酯反应 成酰氯反应 脱羧基反应 叠氮反应 侧链反应 1、氨基参与的反应 与茚三酮反应 与甲醛反应 与2,4-二硝基氟苯（DNFB）反应 与异硫氰酸苯酯（PITC）反应 与DNS(二甲基萘磺酰氯)反应 与亚硝酸反应 酰化反应 与荧光胺反应 1)与茚三酮反应 弱酸性溶液中，加热；蓝紫色，570nm 脯氨酸：黄色，440nm 2)与甲醛反应 可用于氨基保护 应用：测定蛋白质水解进程 3）与2,4-二硝基氟苯（DNFB）反应 弱碱性溶液中；黄色 应用：蛋白质N末端氨基酸的测定 首先由Sanger应用，确定了胰岛素的一级结构 肽分子与DNFB反应，得DNP-肽 水解DNP-肽，得DNP-N端氨基酸及其他游离氨基酸 乙醚提取分离DNP-氨基酸 层析法定性DNP-氨基酸，得出N端氨基酸的种类、数目 4)与异硫氰酸苯酯（PITC）反应 由Edman于1950年首先提出，又称Edman降解法 应用 弱碱 AA PITC+ 多肽 蛋白 AA PTC—多肽 蛋白 无水酸 PTH-AA + 少一个AA的多肽或蛋白 （乙酸乙酯） 用于N末端分析，能够不断重复循环，将肽链N-端氨基酸残基逐一进行标记和解离 5） 与DNS(二甲基萘磺酰氯)反应 DNS-Edman降解法（Edman降解法的改进） 用于测定N端氨基酸 原理DNFB法相同 水解后的DNS-氨基酸不需分离，可直接用电泳或层析法鉴定 由于DNS有强烈荧光，灵敏度比DNFB法高100倍，比Edman法高几到十几倍 可用于微量氨基酸的定量 6）与亚硝酸反应 生成羟基酸、氮气 含亚氨酸的脯氨酸无此反应。 应用：范斯莱克定氮法；测定蛋白质水解程度； 7）酰化反应 酰氯或者酸酐 被酰基取代 应用 多肽合成时用于保护氨基 8）与荧光胺反应 产物具有强烈的荧光 荧光光度计 激发波长390nm，发射波长475nm； 2、羧基参与的反应 成盐反应 成酯反应 酰化反应 脱羧反应 1）成盐反应 与碱作用 2）成酯反应 应用：蛋白质合成中活化氨基； 3）酰化反应 羧基被卤素取代生成酰卤 应用：活化羧基 4）脱羧反应 在弱碱或脱羧酶催化下生成胺； 生物体内氨基酸代谢途径； 几种重要的脱羧产物 氨基丁酸 抑制中枢神经系统 神经组织能量来源 组胺：降低血压； 酪胺：升高血压； 3、侧链基团参与的反应 R基名称 化学反应 用途及重要性 巯基HS- Cys 亚硝基亚铁氰酸钠反应：在现溶液中与亚硝基亚铁氰酸钠反应生成红色 作半胱氨酸及胱氨酸的测定 羟基OH- Thr,Ser 与乙酸或磷酸作用生成酯 丝氨酸及苏氨酸的羟基，用于蛋白质的合成 第三节 氨基酸的分离与测定 层析 流动相 固定相 分配层析 吸附层析 离子交换层析 滤纸 薄层 离子交换树脂 高效液相 Students Union of BUCT 电泳 静电引力 电荷数量 电场强度 运动阻力 分子大小 介质粘度 第四节 肽 一、肽的基本概念 一分子氨基酸的α-羧基与另一分子氨基酸α-氨基脱水缩合的化合物叫做肽 二、多肽的命名 氨基末端 羧基末端 多肽化合物的名称，通常按照肽内氨基酸残基的排列顺序，以残基名称（如某某氨酰）从N端依次阅读到C端，并以C端残基全名结束肽的名称。 下列五肽命名为丙氨酰谷氨酰亮氨酰缬氨酰组氨酸： 三、天然活性肽—谷胱甘肽（GSH） 全称为γ-谷氨酰半胱氨酰甘氨酸，是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸构成的三肽，其中谷氨酸是以γ羧基与半胱氨酸形成肽键 GSH有一个来源于Cys的活泼巯基，容易被氧化成GSSG（二分子还原型GSH脱氢后以二硫键相联的二聚体），故有还原型（GSH）与氧化型（GSSG）两种存在形式。 三、天然活性肽—谷胱甘肽（GSH） 第三章 蛋白质化学(上） 本章内容 蛋白质的元