利用SSR分子标记建立辣椒纯度鉴定体系.pdf

◆试验研究◆ 2010年第 1期 辣椒杂志(季刊) 利用SSR分子标记建立辣椒纯度鉴定体系 白占兵 ， 李雪峰 ， 戴雄泽 ， (1湖南省蔬菜研究所 湖南长沙 410125 2湖南省蔬菜工程技术研究中心 湖南长沙 410125) 摘 要 从 150对辣椒SSR引物 中筛选 出116对多态性较好的引物 ，对兴蔬种业的12个推广辣椒品种的 父本、母本及其F代共36份材料进行PCR差异性筛选 ，其 中6对引物能够 区分每个品种的父本 、母本及其 F代 ；同时对辣椒大群体 DNA的快速提取 、PCR扩增 以及制胶电泳等进行 了优化，初步建立 了基于 SSR分 子标记技术的辣椒种子纯度鉴定体系。为辣椒种子纯度鉴定工作者提供 了参考 ，也为辣椒种子指纹 图谱的 建立奠定 了基础。 关键词 辣椒 ；SSR；纯度 辣椒(CapsicumaHnuumL．)是我国重要的蔬菜， 水稻杂交种的纯度体系 ，并注册国家专利，产生 也是重要的调味品，目前我 国辣椒年种植面积 了巨大的经济效益。 130 160万hm，总产值 270 300亿元 ，需要杂交 我国辣椒每年采用传统种子纯度鉴定方法需要 种975 1200t。随着育种进程的加快，辣椒品种急 土地 554．8～655．2hm2，费用2500～2900万元，如果 剧增多，优质杂交种的种类和需求量的日益增加， 利用SSR分子标记技术只需22 26万元即可完成 使辣椒杂交种质量鉴定研究工作显得极其重要。传 纯度鉴定。因此，辣椒种子纯度鉴定SSR技术体系 统鉴定一般采用田间鉴定法，其依赖于品种表型差 的建立不但为种子企业节约了种子纯度鉴定成本、 异，而大多数形态性状易受环境影响，地点、年度间 为市场提供了优质的种子，还缓减我国人多地少的 也会表现出一定程度的差异，严重的影响了品种纯 矛盾，对我国辣椒杂交种种业的可持续性发展具有 度鉴定的准确性，真实性。 重要意义。 随着分子生物学技术的飞速发展，分子标记技 本研究 旨在利用SSR在辣椒基因组中分布比 术已成为作物品种真实性和纯度鉴定的发展方向。 较均一，提供的遗传信息多，且具有重复性好，稳定 目前，SSR分子标记技术在鉴定种子纯度方面已得 性高，成本较低廉和易于操作等优点，建立辣椒杂交 到广泛应用。其技术原理是从农作物中分离出位点 种纯度快速鉴定SSR分子标记技术体系，为辣椒种 特异微卫星SSR，然后利用两端的独特序列设计一 子纯度鉴定工作者提供参考 ，同时为辣椒种子指 对引物，利用PCR扩增微卫星的长度多态性片段， 纹图谱的建立奠定基础。 以达到种子纯度鉴定的目的。石海波等11报『道用SSR 标记可以鉴别小麦种子的纯度。姚凤霞等嘲报道用 1 材料与方法 SSR分子标记可以鉴定掖单 l3号种子纯度。利用分 1．1材料 子标记鉴定水稻杂交种的纯度在 日本已推广 ；目 材料全部来 自于湖南兴蔬种业有限公司，分别 前，湖南农业科学院已经完善建立了SSR分子鉴定 为：博辣娇红、博辣红玉、博辣红牛、博辣红秀、兴蔬 收稿 日期：2010—02—08 基金项 目：湖南省科技公共平台建设专项 春“夏蔬菜产业提升关键技术研究”(项 目编号K0802172—61) 作者简介：白占兵(1977一)，男，主要从事分子标记辅助育种 32 辣椒杂志(季刊) 2010年第 1期 ◆试验研究◆ 201、兴蔬 301、兴蔬 201、兴蔬绿燕、福湘秀丽、福湘 1．2．4PCR产物的检测 扩增完成后在 8％聚丙烯 碧秀、福湘佳玉 、福湘探春及其它们的父母本 ， 酰胺凝胶上电泳(160V，140min)，电泳完成后观察 共计