气相色谱 液相色谱 归一法操作.doc

气相、液相色谱仪里常说的面积归一法、内标法、外标法等分别是什么意思？面积归一化法,以总面积为100%,计算纯度多用;外标法,需单独用标准品作成一标准曲线,用于分析供试品;内标法,除标准品外,还需引入一种合适的内标物,以标准品与内标物响应值的比值作标准曲线,求解供试品与内标物响应值的比值所对应的供试品的量. 气相色谱准归一化法或相对归一化法以及该方法的应用条件定量测量时，可根据供试品的具体情况采用峰面积法或峰高法，测定杂质含量时须采用峰面积法。 1、内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量 (1)按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和内标物质，分别配成溶液，精密量取各溶液，配成校正因子测定用的对照溶液。取一定量注入仪器，记录色谱图。测量对照品和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算校正因子： As／Cs 校正因子（f）＝——————— AR／CR 式中 As—内标物质的峰面积或峰高； AR—对照品的峰面积或峰高； Cs—内标物质的浓度； CR—对照品的浓度。 再取各品种项下含有内标物质的供试品溶液，注入仪器，记录色谱图，测量供试品中待测成分（或其杂质）和内标物质的峰面积或峰高，按下式计算含量： Ax 含量（C x）＝f×——————— As内／Cs内 式中 Ax—供试品（或其杂质）峰面积或峰高； C x—供试品（或其杂质）的浓度； As内—内标物质的峰面积或峰高； Cs内—内标物质的浓度； f—较正因子 当配制校正因子测定用的对照溶液和含有内标物质的供试品溶液，使用同一浓度的内标物质溶液时，则配制内标物质溶液不必精密称（量）取。 (2) 内标物质的选择 ① 内标物质应是样品中部含有的组分，否则会使峰重叠而无法准确测量内标物质的峰面积。 ② 内标物质的保留时间应与待测成分接近，并达到完全分离，即分离度R1.5。 ③ 内标物质应是纯度符合要求的化合物，若非纯品，无干扰峰也可使用，已知含量的较蠢物质也可使用，但须扣除内标物质的重量。 2、外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量 按各品种项下的规定，精密称(量)取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品待测成分的峰面积（或峰高）。按下式计算 含量： Ax 含量（C x）＝CR————— AR 由于微量注射器不易精确控制进样量，当采用外标法测定供试品中某杂质或主成分含量时，以定量或或自动进样器进样为好。 3、 加校正因子的主成分自身对照法 4、 不加校正因子的主成分自身对照法 5、 面积归一化法 由于峰面积归一化法测定误差大，因此，本法通常只能用于粗略考察供试品中的杂质含量。除另有规定外，一般不宜用于微量杂质的检查。方法是测量各杂质峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积占总峰面积的百分率。 实验十 气相色谱归一化定量分析 1、进一步掌握气相色谱仪的操作要点 2、了解气相色谱各种定量方法的优缺点 3、进一步熟练掌握根据保留值，用已知物对照定性的分析方法 4、掌握用归一化法测定混合物中各组分的含量 ? 二、实验原理 气相色谱的定量分析：峰面积百分比法、归一化法、内标法和外标法等。峰面积百分比法适用于分析响应因子十分接近的组分的含量，要求样品中所有组分均出峰。归一化法定量准确，但它不仅要求样品中所有组分均出峰，而且要求具备所有组分的标准品，以便于测定校正因子。内标法是精密度最高的色谱定量方法，但要选择一个或几个合适的内标物并不总是易事，而且在分析样品前必须将内标物加入样品中。外标法简便易行，定量精密度相对较低，而且对操作条件的重现性要求较严。本实验采用归一化法。 ??? 定量分析的依据：被测组分的质量与其色谱峰面积成正比。即 ??? 峰面积 A 的测量：fi 为比例