转基因抗虫棉花检测技术规范-中国农业质量标准网.docVIP

前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国农业转基因生物安全管理标准化技术委员会（SAC/TC 276）归口。转基因植物及其产品成分检测 基体标准物质候选物鉴定方法 1 范围 本标准规定了转基因植物及其产品成分检测基体标准物质候选物鉴定的程序和方法。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 JJF 1006 一级标准物质 NY/T 673 转基因植物及其产品检测 抽样 NY/T 674 转基因植物及其产品检测 DNA提取和纯化3 术语和定义4 要求 4.1 转基因植物基体标准物质候选物应优先选用可繁殖的材料，如种子等，还应符合以下要求： ——重量应不少于2.5 kg； ——应选择同一物种同一组织器官； ——典型性、转化体纯度和转化体纯合度应满足待定特性量的量值范围要求； ——JJF1006规定的关于候选物的要求。 4.2 转基因植物基体标准物质候选物鉴定机构应符合以下要求： ——应是具有资质的转基因产品成分检测机构； ——应具备标准物质候选物鉴定所需的仪器设备和环境设施。 4.3 转基因植物基体标准物质候选物鉴定人员应符合以下要求： ——应具备转基因产品检测和标准物质研制等相关业务知识； ——应在开展候选物鉴定工作前，接受相关技术和业务知识培训。 4.4 转基因植物基体标准物质候选物鉴定方法应符合以下要求： ——应及时查询同物种的其他转化体的信息，对检测方法进行验证，确保最大范围内对候选物开展典型性鉴定； ——应优先选择国家标准、行业标准、国内技术规范、国际标准。若缺少上述标准方法，可按鉴定机构“非标采标程序”采用适用于候选物鉴定的方法。NY/T 673的规定执行。 5.2 试样制备 5.2.1 典型性鉴定试样制备 取个体数不少于3000，混合均匀，充分研磨。 5.2.2 转化体纯度和纯合度鉴定试样制备 取个体数不少于100，进行单个体处理（如单粒研磨、取单株叶片研磨等）。 5.3 DNA模板制备 按NY/T 674的规定执行。 X= ×100% ………………………………………（1） 式中： a ——含特定转化体个体数； n ——鉴定的样品总个体数。 5.5.2 转化体纯合度鉴定与计算 利用适用于转基因植物转化体纯合度检测的方法，对转基因植物候选物进行转化体纯合度检测，记录纯合体个体数。 转化体纯合度（Y），按公式（2）计算。 Y= ×100% ……………………………（2） 式中： a ——含特定转化体个体数； b ——纯合体个体数。 5.5.3 转基因成分含量估算 转基因成分含量估算值（Z），按公式（3）计算。 Z=X×Y×100% ………………………………………（3） 式中： X ——转化体纯度； Y ——转化体纯合度。 6 判定 6.1 判定依据 6.1.1 典型性鉴定判定依据 转基因植物基体标准物质候选物的转化体特异性检测结果为阳性，其他转化体特异性检测结果为阴性，表明转基因植物候选物的典型性符合要求； 对应的非转基因植物候选物的转化体检测结果和其他转化体检测结果均为阴性，表明非转基因植物候选物的典型性符合要求。 6.1.2 转化体纯度和纯合度鉴定判定依据 转基因植物基体标准物质候选物的转化体纯度（5.5.1）不低于待定特性量值的2倍或转基因成分含量估算值（5.5.3）不低于待定特性量值，表明转基因植物基体标准物质候选物的转化体纯度和转化体纯合度符合要求。 6.2 结果判定 转基因植物基体标准物质候选物典型性符合要求，且转化体纯度或转基因成分含量估算值符合要求，表明该候选物适合用作转基因植物基体标准物质候选物；反之，不适合。 非转基因植物基体标准物质候选物典型性符合要求，表明该候选物适合用作非转基因植物基体标准物质候选物；反之，不适合。 NY/T ××××—2005 2 1 农业部XXXX号公告-X-XXXX 2 I 农业部XXXX号公告-X-XXXX 农业部XXXX号公告-X-XXXX 4 3 ICS 中华人民共和国国家标准 农业部XXXX号公告-X-XXXX a n 中华人民共和国农业部 发布 XXXX-XX-XX实施 b+1/2×(a-b) a XXXX-XX-XX发布 转基因植物及其产品成分检测 基体标准物质候选物鉴定方法 Detection of genetic