绵羊血浆催产素水平定量检测方法的建立-江苏农业科学.pdfVIP

江苏农业科学　２０１７年第４５卷第５期 — １５７— 席　丽，闫永锋，秦新喜，等．绵羊血浆催产素水平定量检测方法的建立［Ｊ］．江苏农业科学，２０１７，４５（５）：１５７－１６０． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１７．０５．０４５ 绵羊血浆催产素水平定量检测方法的建立 １ １ ２ １ １ １ 席　丽 ，闫永锋 ，秦新喜 ，韩进诚 ，瞿红侠 ，张进良 （１．商丘师范学院，河南商丘４７６０００；２．普莱柯生物工程股份有限公司，河南洛阳４７１０００） 　　摘要：建立采用高效液相色谱 －串联质谱（ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ－ｔａｎｄｅｍｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ， ＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）测定绵羊血浆中催产素（ｏｘｙｔｏｃｉｎ，ＯＴ）的方法。经乙腈沉降法提取血浆样品，在多反应离子监测（ｍｕｌ ｔｉｐｌｅｒｅａｃｔｉｏｎｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ，ＭＲＭ）模式下进行检测，标准加入法定量。通过该方法获得标准曲线线性方程为ｙ＝１．４４８ｘ＋ ５４４．４００，相关系数为０．９９８，线性范围在５０～１００００ｐｇ／ｍＬ，方法检出限为 １０ｐｇ／ｍＬ，定量限为５０ｐｇ／ｍＬ。应用 ＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法测定醋酸去甲雄三烯醇酮－１７ 雌二醇（ｔｒｅｎｂｏｌｏｎｅａｃｅｔａｔｅａｎｄｅｓｔｒａｄｉｏｌ－１７，ＴＢＡ－Ｅ）联合处理阉 β β ２ 公羊血浆中ＯＴ浓度变化，其中对照组催产素浓度为５５～８０ｐｇ／ｍＬ，ＴＢＡ－Ｅ处理组为７５～１６０ｐｇ／ｍＬ，表明ＴＢＡ－Ｅ ２ ２ 可提高阉公羊血浆中的ＯＴ浓度。该方法简便、快速、准确，可用于血浆样品中ＯＴ的检测。 　　关键词：高效液相色谱－串联质谱；多反应监测；乙腈沉降法；催产素；血浆 　　中图分类号：Ｓ８５８．２６７．２　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１７）０５－０１５７－０４ 　　ＯＴ是一种环状的九肽类神经垂体激素，由下丘脑视上核 确，能够满足血浆中催产素水平的快速检测和确证的要求。 和室旁核的神经内分泌细胞合成和分泌，经下丘脑 －垂体轴 １　材料与方法 投射到垂体后叶，再释放入血。大脑是产生ＯＴ的主要部位， ［１］ １．１　仪器与试剂 但子宫、生殖腺、心肌、胸腺等组织也能合成 ＯＴ 。ＯＴ作为 激素和神经递质具有重要的生物学作用，临床上主要用于催 Ｕｌｔｉｍａｔｅ３０００型高效液相色谱系统（Ｄｉｏｎｅｘ公司）；Ｇｒａｃ 生引产，产后止血、缩短第三产程和刺激泌乳。此外还具有广 ＴＭ ｅｓｍａｒｔ ＲＰＣ１８色谱柱（１５０ｍｍ×２ｍｍ，５ ｍ，ＧｒａｃｅＤａｖｉｓｏｎ μ 泛的生理作用，尤其是对中枢神经系统的作用，例如，通过对 公司）；电喷雾电离源 －ＡＰＩ４０００型三重四极杆串联质谱仪 垂体的分泌功能起作用，从而调节促肾上腺皮质激素释放激 （ＡｐｐｌｉｅｄＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ公司）；ＶＭ１型漩涡混合器（Ｒａｔｅｋ公 素的释放，促进催乳素、促性腺激素的分泌，调节生长激素的 司）；ＰＳ－２０型超声清洗机（Ｕｎｉｓｏｎｉｃ公司）；５４２４Ｒ型台式高 ［