不同长度thvhac1基因启动子片段分离及活性分析.pdfVIP

第 52 卷 第 1 期 林 业 科 学 Vol. 52 ，No. 1 2 0 1 6 年 1 月 SCIENTIA SILVAE SINICAE Jan ． ，2 0 1 6 doi :10 ．11707 / j ．100 1-7488 ．20 160 107 * 不同长度 ThVHAc1 基 因启动子 片段分离及 活性分析 杨桂燕 郭宇聪 张凤娇 赵 震 高彩球 (林木遗 传 育 种 国家重点实验 室 东北林业大学 哈尔滨 150040 ) : 【 】VHA c (V-ATPase c ) V-ATPase ， 、 ， 摘 要 目的 基 因 亚基 是 的重要 亚 基 能 响应 盐 重 金 属 等 胁 迫 过 表 达 刚毛 柽柳 Th VHA c1 基 因 的酵 母 能提 高抗 CdCl2 耐 NaCl 能力 。本研究 拟 通 过 分 离 Th VHA c1 基 因不同长度 启 动子 片 段 并 ， Th VHA c1 CdCl NaCl 。 【 】 Th VHA c1 对 其 胁 迫 后 活性进 行 分析 以进 一 步探 讨 基 因响应 2 和 胁 迫 的机制 方法 根 据 基 Dof ， Th VHA c1 205 bp ( － 1— － 205 ) ，504 bp ( － 1— 因启动子 中含 有 的 顺 式 作用 元 件 的分布 将 基 因上游 启动子 分 为 － 504 ) 和 78 1 bp ( － 1— － 78 1) 3 个 不同长度 片段 。将 这 些 不同长 度 启 动子 片 段 分 别 替 换 pCAMBIA 130 1 载 体上 的 CaMV35 S ， GUS ， ， 。 4 T 启动子 以驱 动 基 因表 达 构 建 植物 表 达 载 体 利 用 农 杆 菌介 导 法 转 化 拟 南 芥 对 周 龄 的 4 代 转 H O ( ， ) 、100 mmol ·L － 1 NaCl 150 mol ·L － 1 CdCl ， 基 因拟 南 芥 分 别进 行 2 非胁 迫 处 理 对 照 和 μ 2 胁 迫 处 理 比较不同 转 基 GUS GUS 。 【 】