试验七中药化学成份的预试验.PDF

实验七 中药化学成份的预试验 中药中所含的化学成份较为复杂，在提取分离某种中药成份之前，一般可先 进行简单的预试验，初步了解其中可能含有哪些类型的成份，以便对今后的提取 分离工作提供一定的参考。预试验方法一般可分为两大类：一类是单项预试验， 即根据需要重点检查某类成份，例如寻找含生物碱成份，仅需进行生物碱的定性 反应，以检查生物碱的存在与否。另一类是系统预试法，即选用简单的定性方法 对中药中各类成份进行较为全面的试验。 一、目的要求 1．学习中药化学成份的预试验方法及原理。 2 ．掌握中药预试验的程序及结果的判断。 二、实验原理 系统预试和单项预试的基本原理基本相似，首先制备供试液，然后进行各类 成份的检识。制备供试液主要是利用各类化学成份在不同溶剂中的溶解度不同分 成数个部份，如水溶性、醇溶性及石油醚溶性部份。有时还可结合化合物的酸碱 性不同，采用酸或碱处理，使其再细分为含酸性、含碱性及含中性的化合物部份。 如欲进一步了解预试的结果，也可根据化合物极性大小和分子分配子数不同采用 吸附溥层层析或纸层析进行观察。 制成供试液后就可分别进行各类成份的检识，根据检出结果确定药材中含有 哪些类型的化学成份。一般预试的结果只能参考，因为预试所采用的检出反应往 往不是专属性很高的反应，或是各类成份之间存在干扰，使结果不明显或不正确。 因此，要学会根据检识反应的检识范围及供试液的制备方法和层析结果诸因素综 合考虑后再作一个恰当的结论。 三、实验内容 （一）实验样品制取方法 1． 水浸液 取中药粉末 4g ，加40ml 蒸馏水浸泡过夜，滤取 3ml 滤液供检查氨基酸、多 肽和蛋白质，其余部份放在 60℃水浴加热约 10min，过滤，滤液供糖、多糖、有 机酸、皂苷、苷类、酚类、鞣质等项的预试。 2 ． 乙醇提取液 取中药粉末约 5g，加 60ml95%乙醇，于水浴中加热回流 20min ，过滤。其 中 30ml 滤液供黄酮类化合物、蒽醌、鞣质、苷类、有机酸、香豆素、萜类、内 酯、甾体等项的预试，其余滤液浓缩至 1ml，供圆底滤纸层析时点样用。 如中药中的叶绿素较多，应先除去。可将药材用 95%乙醇加热回流，提取液 加水使其含醇量为 70%，再倾入分液漏斗中，用等体积的石油醚提取两次，以除 去叶绿素，分出下层 70%乙醇提取液，减压浓缩至糖浆状，冷却过滤，再做上述 试验。 3 ． 酸性醇提取液 取中药粉末 2g ，加 0.5%盐酸的乙醇溶液 10ml，水浴上回流 10min，过滤， 20 滤液供生物碱检查用。 （二）试管及滤纸片预试法 1． 检查生物碱 取酸性醇提取液，先用稀 NH OH 调至中性，水浴蒸干。再加 5%H SO 4ml 4 2 4 溶解残渣，过滤，滤液供以下试验用。 （1）碘化汞钾试剂（Mayer ）：取滤液lml，加入试剂 1~2 滴，如有浅黄色或白 色沉淀，可能有生物碱。 （2 ）碘化钠钾试剂（Dragendorff 试剂）：取滤液 lml，加入试剂 1~2 滴，如有 红色沉淀产生，可能有生物碱存在。 （3 ）硅钨酸试剂：取滤液 lml，加入试剂 1~2 滴，如有浅黄色或灰白色沉淀可 能含有生物碱。 2 ． 检查氨基酸、多肽和蛋白质 （1）双缩脲试验（Biuret 反应）：取 1%硫酸铜溶液与 10%氢氧化钠溶液各 lml 混合。取 1m1 冷水浸液，加入上述试剂，摇动后如显紫红色，表示含多肽 或蛋白质。 （2 ）茚三酮试剂（Ninhydrin 试剂）：取冷水浸液lml ，加入 0.2%茚三酮乙醇溶 液 2~3 滴，摇匀，在沸水浴中加热 5min，冷却后，如显蓝色或蓝紫色，表 明含有氨基酸、多肽或蛋白质。 3 ． 检查有机酸 （1）用PH 试纸检查：将热水提取液和乙醇提取液分别用 PH 试纸检查，如呈酸 性，则可能含有游离酸或酚性化合物。 （2 ）溴酚蓝试剂：点乙醇提取液于滤纸片上，喷洒0.1%溴酚蓝试剂，如在蓝色 背景上显黄色斑点，表明可能含有机酸（如不明显，可再喷洒氨水，然后 暴露在盐酸气体中，背景逐渐由蓝色变为黄色，