常见人类疾病动物模型及研究进展.ppt

（三）诱发性胃癌动物模型 1、造模机制 甲基硝基亚硝基胍和甲基胆蒽为常用致癌物。 2、操作方法和结果 甲基硝基亚硝基胍（MNNG）诱发大鼠胃癌：体重100g作用的雄性Wistar大鼠，自由饮用30-100μg/mL的MNNG水溶液，不给予其他饮水，持续6个月以上 ，其发生率在80%左右，以高分化腺癌为主。 一、诱发性肿瘤动物模型 （四）诱发性结肠癌动物模型 1、造模机制 动物结肠癌自然发生率很低，目前常用的致癌物以二甲基苄肼较好，即可口服又可注射。 2、操作方法和结果 二甲基苄肼（DMH）诱发大鼠结肠癌：选6周雄性Wistar大鼠。将MMNG用33%的乙醇配成0.67%的醇溶液，用导尿管由肛门插入7-8cm深（相当于结肠左曲部），注入MMNG 0.3mL，每周2次，共25次。于实验12-13个月处死动物，诱发的结肠癌主要发生在肠壁粘膜面，多为腺癌和混合癌。 一、诱发性肿瘤动物模型 诱发性肿瘤动物模型的注意问题： 必须适当选择：致瘤方法、动物种系、致癌物种类及溶剂、给药剂量与途径及观察时间等尽量简便可行，有较好的重复性，并有利于与人肿瘤比较。 早期应预防动物感染，特别是肺部感染。 注意环境污染。 一、诱发性肿瘤动物模型 诱发性肿瘤动物模型的评价: 约80%的人类癌症是由环境引起，实验动物诱发性肿瘤的病因及人类癌症的情况相近。 诱发性肿瘤动物模型最大的缺点是诱癌时间长，动物之间的个体差异大。 一、诱发性肿瘤动物模型 二、移植性动物模型 第四章 肿瘤疾病动物模型 1、移植性肿瘤动物模型的概念 是指将动物或人肿瘤移植到同种或异种动物体内连续传代而形成的肿瘤。 目前，临床上常用的抗肿瘤药大多是首先经动物移植性肿瘤筛选而发现的。 2、动物选择 大、小鼠、地鼠 3、肿瘤细胞选择 肿瘤细胞株是指通过选择法或克隆法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊遗传、生化性质的细胞群。 原代培养细胞经首次传代成功后即为细胞系。 瘤株在组织形态和生长特性方面趋于稳定，并能在同系、同种或异种动物体内移植并连续传代。 二、移植性动物模型 3、肿瘤细胞选择 目前，动物移植性实验肿瘤（实体瘤、腹水瘤和白血病）种类很多，常用有40多种，多为小鼠肿瘤。 瘤株的选择应尽量考虑及临床拟研究的肿瘤性质、部位相近。 二、移植性动物模型 4、移植方法： (1)一般要求 整个过程应在无菌条件下进行；对实体瘤应用灭菌的手术器械切取，对腹水瘤应用注射器抽吸； 常接种的部位：实体瘤可接种腋窝皮下，肌肉接种用大腿肌；腹水瘤接种于腹腔。 二、移植性动物模型 （2）接种操作 接种的基本过程 冻存的瘤株 移入宿主体内 获得瘤块 （瘤源动物） 制备瘤块 给动物接种 7-10d 二、移植性动物模型 A、实体瘤 瘤块接种法： 肿瘤细胞皮下接种——7-10d处死荷瘤动物——选择生长良好、无坏死液化的瘤组织——2-3 mm3 + 生理盐水或其它营养液——无菌套管针抽吸——接种同种受体动物右前腋窝皮下。 二、移植性动物模型 瘤细胞悬液接种法：接种动物较多 无菌取出瘤块，将瘤块剪成小块，放入玻璃匀浆器中，加无菌生理盐水研磨后，经80-100目网筛过滤 ，加生理盐水稀释成1：3～1：4（肿瘤g：生理盐水mL）的单细胞悬液，用胎盘蓝染色法计数，用1mL注射器注射到接种部位，每点接种 0.2 mL（含1×106～×107个细胞），每只动物可有多个接种点。 二、移植性动物模型 培养细胞接种法： 将对数生长期细胞用0.25%胰蛋白酶消化脱壁后，用PBS以1000 r/min 离心10 min，洗涤2次；用胎盘蓝染色计数，生理盐水稀释，用1mL注射器注射到接种部位，每点接种0.2mL（含1×106～1×107个细胞），每只动物可有多个接种点。 二、移植性动物模型 B、腹水瘤 （1）抽取腹水 选择接种后5-7d的瘤源动物，脱臼致死，腹部消毒，打开腹腔，用注射器抽吸腹水，抽出的腹水。另取少量腹水，置于加有肝素的试管内，用于细胞计数；用生理盐水将腹水稀释至适当浓度，每只鼠腹腔注射0.1-0.2 mL（含1×106～1×107个细胞)。 二、移植性动物模型 （一）兔VX2肝癌模型 1、造模机制