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加减三甲散及其拆方对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡影响 　 作者：乔胃娟 杨宇 周新颖 袁建 刘旺华 闫颖 【摘要】 目的 通过观察加减三甲散及其拆方对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响，部分阐明本方及拆方治疗肝纤维化的机理。 方法 使用四氯化碳诱导复制大鼠肝纤维化模型，观察各组对大鼠肝细胞凋亡的影响。结果 各治疗组均能显著降低凋亡细胞数，与模型组比较，差异有非常统计学意义（P＜0.01）。结论 加减三甲散及其拆方能够通过降低细胞凋亡对实验性肝纤维化起到一定的治疗作用。 【关键词】 加减三甲散 滋阴 肝纤维化 肝细胞 凋亡 【Abstract】 Objective: To partly clarify the mechanism of Modified San Jia Powder and its Sub-Formulas on hepatic fibrosis by observing the Effects of them on hepatic cell Apoptosis of rats with hepatic fibrosis. Methods: Using CCl4 to copy the hepatic fibrosis model in rats, and hepatic cell Apoptosis is tested. Results: All the therapeutic groups can decrease the level of Apoptosis（P＜0.01）。 Conclusion: Modified San Jia Powder and its Sub-Formulas have the effects on experimental hepatic fibrosis by lowering the level of Apoptosis. 【Key words】 Modified San Jia Powder Yin-enriching hepatic fibrosis hepatic cell Apoptosis 肝纤维化是各种慢性肝病发展过程中的共同病理表现，是慢性肝病向肝硬化发展中的主要中间环节[1]。“客邪交固于血脉，主客交浑，最难得解，久而愈固，治法当乘其大肉未消、真元未败，急用三甲散，多有得生者”。三甲散乃吴又可创制，加减三甲散为本课题组在三甲散的基础上加以调整，为临床上治疗肝病的经验方。本实验在“主客交”理论指导下，通过观察加减三甲散及其拆方对肝纤维化大鼠肝细胞凋亡的影响，探讨该方治疗肝纤维化的机理。 1 实验材料 1.1实验动物 雄性SD大鼠 体重180～200g，由成都中医药大学实验动物中心提供。 1.2 实验药品 (1)加减三甲散及其拆方组水煎液(全方组药物:龟板15g、穿山甲10g、僵蚕10g、蝉蜕5g、鳖甲15g、土鳖虫10g、桃仁10g、当归10g、柴胡10g、白芍10g、甘草5g；滋阴组药物：鳖甲15g、龟板15g、当归10g、白芍10g、甘草5g；去滋阴药组药物：穿山甲10g、僵蚕10g、蝉蜕5g、土鳖虫10g、桃仁10g、柴胡10g) 购自北京同仁堂成都分店。以上药物经加水浸泡、常规煎煮、过滤及水浴蒸发制成每毫升含1g生药的水煎液（浓度100％），高温灭菌后4℃冰箱保存备用。 （2）秋水仙碱片：云南植物药业有限公司生产，0.5mg/片，批号0.5mg溶于10ml蒸馏水配成悬浊液，4℃冰箱保存备用。 1.3 实验试剂 （1）四氯化碳分析纯专用试剂 纯度≥99.5% 质量标准GB/T688-1992 密度1.592～1.598(20℃)四川航嘉生物医药科技有限责任公司 批号常温保存备用。 （2）鲁花花生油 山东鲁花集团有限公司，批号：3700116036。 　 （3）TUNEL凋亡检测试剂盒：美国ROCH公司产品。 1.4实验仪器 显微镜（LEICA DM 4000B）。 2 实验方法 110只大鼠随机分为正常对照组、病理模型组、阳性对照组、加减三甲散组、滋阴组、去滋阴药组，除正常对照组为10只外，其余各组各20只。除正常组外，其余各组均用四氯化碳腹腔注射造模，0.2ml/100g，首次0.5ml/100g，2次/周，共8周。加减三甲散组、滋阴组、去滋阴药组造模同时给予药物治疗，每天上午8点灌胃，连续8周。给药剂量按有关成人日用量与大鼠的体重体表面积比折算为等效剂量分别灌胃给予相应药物，阳性对照组予秋水仙碱水溶液0.5×10-3g/kg，加减三甲散组给予加减三甲散浸膏11g生药/kg，滋阴组给予滋阴药物浸膏5.5g生药/kg，去滋阴药组给予去滋阴药物5.5g生药/kg。