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毛豆腐的毛霉发酵与其提取物的体外ACE抑制活性
杭梅,赵新淮*(东北农业大学乳品科学教育部重点实验室,黑龙江哈尔滨150030)摘要:利用分离得到的1株毛霉发酵豆腐制备毛豆腐。采用20%、40%、60%(v/v)乙醇溶液作为提取溶剂,对发酵时间为3、5、7、9d的毛豆腐样品进行提取,测定提取物中可溶性蛋白质的提取率、水解度,以及提取物的体外ACE抑制活性。研究结果表明,随着毛豆腐发酵时间的延长,提取物中可溶性蛋白质提取率、水解度逐渐增加;毛豆腐发酵第5d时,60%(v/v)乙醇溶液提取物的ACE抑制活性最高,并且其氨基酸组成分析结果表明,60%(v/v)乙醇溶液提取物中总疏水性氨基酸和脯氨酸的量最多。关键词:毛霉,毛豆腐,乙醇提取物,ACE抑制活性FermentationofMao-tofubyMucorspp.andACE-inhibitoryactivityofitsextractsinvitroHANGMei,ZHAOXin-huai*(KeyLaboratoryofDairyScience,MinistryofEducation,NortheastAgriculturalUniversity,Harbin150030,China)Abstract:CommercialtofuwasfermentedwithastrainofMucortoprepareMao-tufu.Mao-tofusamplesfermentedfor3,5,7,9dayswereextractedbythreeethanolsolutionswithethanolcontractionof20%,40%and60%(v/v),respectively.Theextractionyieldanddegreeofhydrolysisofthesolubleproteinfractionsintheextractswereanalyzed.TheACE-inhibitoryactivityoftheextractswasalsoevaluatedinvitro.TheresultsshowedthatthelongerthefermentationtimeofMao-tofusamples,thehigherextractionyieldanddegreeofhydrolysisofthesolubleproteinfractionsintheextracts.WhenMao-tofusamplewasfermentedfor5days,itsextractof60%(v/v)ethanolsolutionshowedthehighestACE-inhibitoryactivity.Meanwhile,theaminoacidcompositionsobtainedindicatedthattheextractof60%(v/v)ethanolsolutionhadthehighestamountoftotalhydrophobicaminoacidsandproline.Keywords:Mucorspp.;Mao-tofu;ethanolextracts;ACE-inhibitoryactivity中图分类号:TS201.3文献标识码:A文章编号:1002-0306(2011)11-0187-04中含有ACE抑制活性肽[10]。我们曾经研究过毛豆腐发酵过程中主要成分、微细结构等的变化[11],并确定了毛霉产蛋白酶的适宜发酵条件[12],并未评价毛豆腐中蛋白质的生物活性,不能确定毛霉发酵是否能够使得毛豆腐提取物具有ACE抑制作用。为此,根据过去的工作基础,本研究利用以前分离得到的1株毛霉菌种,实验室发酵制备毛豆腐样品,然后利用3种组成比例不同的乙醇水溶液为提取剂,对发酵时间不同的毛豆腐样品分别进行提取,分析各种提取物中蛋白质组分的含量及其水解度大小,然后测定其体外的ACE抑制活性,最后对具有最高活性的提取物进行氨基酸组成分析。近年来,人们对具有预防或治疗某些疾病的食品成分产生了兴趣[1-2]。大豆发酵制品具有某些较好的生理功能,诸如抗癌、抗氧化、抗菌和降血压等[3]。大豆发酵制品的降血压功能,主要源于其中所含有的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽,这类肽已从许多大豆制品中提取并被研究[1,4-5]。毛豆腐是我国徽州的著名小吃[6],是利用微生物发酵豆腐所制成的发酵食品,可以有效地提高大豆的消化率和生物价[7]。毛霉是生产毛豆腐的主要菌种。毛霉能分泌蛋白酶,将蛋白质分解生成氨基酸和多肽等,使食品具有独特的风味和细腻的质地。毛豆腐的制作工艺与腐乳相似,而关于腐乳的降血压功能已有多个研究报告。已有研究者研究日本腐乳和中国腐乳的ACE抑制活性[8-9]。倪莉认为,在腐乳的水溶性成分材料与方法材料与设备豆腐购
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