超高效液相色谱.串联质谱法快速测定.PDF

第45卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 第 1期 2017年 1月 ChineseJournalofAnalyticalChemist~ 124—132 DOI：10．u895／j．issn．0253-3820．160530 超高效液相色谱．串联质谱法快速测定 猪尿液中30种不同种类 “瘦 肉精药物残留 孙晓亮 李雪莲 曹旭敏 ， 杨艳菲 ，4 王 娟 ，。 王淑婷 王玉东 ， 王晓茵 ， 曲志娜 ， 赵思俊 ， (中国动物卫生与流行病学中心动物产品安全监测室，青岛266032) (农业部畜禽产品质量安全风险评估实验室(青岛)，青岛266032) (青岛易邦生物工程有限公司，青岛266114) (安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036) 摘 要 建立了超高效液相色谱一串联质谱快速简单地同时测定猪尿液中3O种不同种类 “瘦肉精”药物 (赛 庚啶、可乐定及28种卢一受体激动剂类)残留的方法。对液相色谱分离条件、MS／MS检测参数及样品前处理方 式进行了优化。试样经5000r／min离心5rain后直接经 MCX柱净化，分别用3mL水和3mL甲醇淋洗，5％ 氨化甲醇进行洗脱，N：吹干后以流动相进行复溶，UPLC-MS／MS进行测定。结果表明，30种药物可在5．0min 内有效分离；各药物在0．1—10 L范围内呈 良好的线性关系，相关系数均大于0．992；方法的检出限为 0．1 L，定量限为0．3 g／L。在 3个浓度水平下的平均回收率为67．6％～103．2％，日内、日间相对标准偏 差分别为2．8％ 16．8％和2．6％ 15．8％。 关键词 超高效液相色谱一串联质谱法 ；痕量残留；猪尿液 ；瘦肉精 1 引 言 “瘦肉精”(Leanmeatagents)最早是盐酸克伦特罗的俗称，现在泛指一类可以促进动物生长，提高 瘦肉率的药物…，主要包括盐酸克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺、苯乙醇胺 A、氯丙那林等 ．受体激动 剂 ，以及近年来监测发现的赛庚啶、可乐定等具有促进动物生长、提高饲料转化率的化合物 ]。由于上述 药物在动物性食品中的极易残留，会对食用者产生系列毒副作用，因此，包括我国在内的许多国家和国际 组织已经制定了极其严格的规定。到 目前为止，我国已明确禁止在食品动物养殖过程中使用克伦特罗、沙 丁胺醇、莱克多巴胺、苯乙醇胺A、氯丙那林、多巴胺、班布特罗、齐帕特罗、马布特罗、西马特罗、溴布特 罗、福莫特罗／阿福特罗、特布他林、赛庚啶、可乐定共 15种具有促进动物生长、提高瘦肉率的药物 J。 近年来 ，我国加大了对明令禁止的上述 15种 “瘦肉精”非法使用的打击力度，“瘦肉精”药物在畜禽 养殖中的非法使用得到了有效遏制，然而具有促进动物生长、提高瘦肉率功效、而未被列人国家禁用药 物名单的 一受体激动剂同系物或衍生物 (如克罗潘特、羟甲基克伦特罗、克伦丙罗、西布特罗、妥布特 罗、马喷特罗、喷布特罗、卡布特罗、丁酚胺、利托君、克伦己罗、克伦塞罗、异克伦潘特、溴氯特罗、苯氧丙 酚胺等)极易被不法分子利用，作为新型 “瘦肉精”替代物，用于生猪养殖过程中，达到非法牟利的目的， 进而威胁广大消费者的健康安全。 尿液常被选择作为药物代谢、残留消除实验的重要靶组织，而且，与其它组织样品相比，尿液在样品 采集过程中可有效避免对动物造成损伤，因此，动物尿液通常作为大批量样品监测的测试对象 j。近 年来，研究者针对动物尿液中 ．受体激动剂药物残留建立了包括液相色谱 J、气相色谱-串联质谱 j、 液相色谱．串联质谱 、ELISAl1、胶体金试纸法 ¨、免疫传感器 、液相芯片法 等一系列快速 检测及定量确证检测方法。而赛庚啶、可乐定作为新型 “瘦肉精”药物，分别属于H 受体拮抗药和O／一 受体激动剂 ¨，J，其化学结构与 一受体激动剂药物有较大的差异 (各药物的化学结构见图1)，理化特 性、色谱行为也有较大差别，因而同时检测赛庚啶、可乐定与 ／3受体激动剂的方法鲜有报