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实验一 动物基本操作介绍 生理教研室 吕心瑞 机能学实验 生理实验课的目的 1.正确使用仪器设备; 2.初步掌握生理学实验的基本操作技术，了解获得生理学知识的科学方法; 3.验证和巩固生理学的基本理论; 4.培养观察、比较、分析和综合的能力以及独立思考、解决实际问题的能力. 生理实验课的要求 实验前：预习 复习 预测 实验时：认真听讲 按步骤操作 人人动手 仔细观察 勤于思考 爱护动物和设备 实验后： 清洁实验用品 收集实验资料 按时交实验报告 实验报告的要求（六部分） 实验题目 1.实验目的 2.实验对象 3.实验结果 4.实验讨论（重点） 5.实验结论（1或2句话概括） 一、动物实验的基本操作技术 （一）手术器械介绍 （二）动物基本操作技术 1.动物捉持方法和固定 2.动物基本操作 1.麻醉 2.备皮 3.切口与止血 4.肌肉、神经和血管分离 5.动脉插管 哺乳类动物实验常用手术器械 1.注射器：用于注射药液 2.剪毛剪：用于术部剪毛 3.手术刀：用于切割皮肤、肌肉和脏器 4.止血钳：除用于止血外，有齿的用于提起皮肤，无齿的用于分离皮下组织 5.外科镊：用于夹捏较大或较厚的组织，牵拉皮肤切口 6.外科剪：用于剪皮肤、皮下组织、肌肉等 7.眼科剪：用于剪血管、神经 8.眼科镊：用于捏和分离神经、血管等 9.骨钳：用于咬切骨质 10.骨剪：用于剪切骨质 实验二 刺激强度和刺激频率与肌肉收缩的关系 实验目的 学习蛙腓肠肌标本的制备。 观察刺激强度对肌肉收缩的影响。 观察刺激频率对肌肉收缩的影响。 【实验原理】 刺激与兴奋 神经纤维具有兴奋性和传导性； 肌肉组织具有兴奋性与收缩性，肌肉收缩是其兴奋的外在表现。 刺激产生兴奋，肌肉兴奋导致肌肉收缩 坐骨神经干属于混合神经，内含多条阈值各不相同的神经纤维。 腓肠肌也含有多条肌纤维，受多个运动单位的控制。 刺激强度的变化可以引起坐骨神经中被兴奋神经纤维数量的变化，通过运动单位控制相应数量的肌纤维收缩，产生不同的张力变化。 一条神经纤维 或骨骼肌纤维 “全或无” (all-or-none) 达到阈值→神经纤维，肌纤维兴奋并收缩 超过阈值→收缩力不增加 一根坐骨神经 一块骨骼肌 一定范围内，肌肉收缩力 的大小与刺激强度成正比 阈下刺激→无兴奋无收缩 阈刺激→兴奋性最高的神经纤维兴奋，少数肌纤维兴奋并收缩 刺激强度↑→神经纤维被兴奋数量↑，兴奋收缩的肌纤维数量↑，收缩力↑ 最适强度→所有神经纤维和肌纤维均兴奋，收缩力最大 ＞最适强度→收缩力不增加 刺激频率对肌肉收缩的影响 单收缩：刺激落在前一次刺激引起的收缩的舒张期之后 不完全强直收缩：刺激落在前一次刺激引起的舒张期内 完全强直收缩：刺激落在前一次刺激引起的缩短期内 两/多个阈上刺激，相继作用于神经-肌肉标本，如果刺激间隔大于单收缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩； 较高频率连续刺激作用于标本时，出现多个收缩反应的融合，新收缩过程与上次尚未结束的收缩过程发生总和，称为强直收缩（复合收缩）。 后一收缩发生在前一收缩的舒张期时，称为不完全强直收缩。 后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，各自的收缩完全融合，肌肉处于持续的收缩状态，称为完全强直收缩。 材料 牛蛙、蛙板、剪刀、杀蛙针、玻璃分针、镊子、张力换能器、生物信号采集系统、任氏液等 实验对象：牛蛙（蟾蜍或蛙） 器材和药品：蛙类手术器械一套，手术线，任氏液，注射器，BL-420F生物机能实验系统，张力换能器，铁支架 实验方法（腓肠肌标本的制备） 1. 毁脑脊髓 （或剪掉头部，再捣毁脊髓） 2．俯卧位固定 3．剥皮（之后洗净双手和用过的全部手术器械） 4．分离一侧腓肠肌标本 ，跟腱处穿线结扎，剪短 结扎线远端 5．提起结扎线远端，连接仪器 6．电刺激腓肠肌 实验方法与步骤 破坏脑和脊髓：左手持蛙，用食指下压头部，拇指按压背部，使头前俯。右手持探针从枕骨大孔处垂直刺入，再将针插向前方刺入颅腔搅碎脑组织。将探针退回进针处，向下刺入椎管捣毁，待蛙四肢松软，表明脑和脊髓已完全破坏 实验装置连接 将腓肠肌跟腱的结扎线固定在张力换能器的悬臂梁上（不宜太紧，线与桌面垂直）。 把穿好线的坐骨神经轻轻提起，放在刺激电极上，保证神经与刺激电极接触良好。 换能器的输出端与生物信号采集处理系统的输入通道相连。 启动生物信号采集系统软件，选择好通道和采样参数设置，启动记录按钮，开始记录。 .连接张力换能器：将跟腱处的手术线一端连接张力换能器，注意不要牵拉过紧，使肌肉处于自然长度 .信号采集：用刺激电极刺激坐骨神经，并使用BL-420F生物机能实验系统采集信号 BL-420F生物机能实验系统 →实验项目 →肌肉实验 →刺激频率与反应关系