液相的日常保养 一、 储液器 1、 尽可能使用HPLC级的溶剂和试剂 2.DOC

液相的日常保养 一、 储液器 1、 尽可能使用HPLC级的溶剂和试剂。 2、 含有缓冲盐和非HPLC级的流动相，一定要通过0.45um的滤膜过滤以除去微粒物质。 3、 防止流动相交叉污染，过期的流动相，以及用久的试剂的试剂瓶，应定期废弃，防止生长微生物。 4、 储器内壁定期清洗。 二、 泵 1、 每天要把泵中的缓冲液冲洗干净，防止盐沉积，泵要浸在无缓冲盐的溶剂或有机试剂中。 2、 用HPLC级试剂。 三、 进样器 1、 停止后要用溶剂冲洗干净进样器内残留样品和缓冲盐，防止无机盐沉积和样品微粒造成阀转子面磨损或阻塞。 2、 不要用气相色谱仪的尖头进样针。 四、 柱 1、 溶剂的化学腐蚀性不能太强。 2、 避免微粒在柱头沉降。 3、 尽量装保护柱。 4、 不用时，一定要洗去缓冲液防止生长微生物，柱两端加大于50%的有机溶剂用盖拧紧，保护柱湿润。 五、 检测器 1、 要保持检测器清洁，每天连柱一同清洗。 2、 提倡不定期用强溶剂反向冲洗检测器，但要拆开柱子。 3、 不用时，不要打开灯，因为灯有一定寿命。 六、 常见问题以及处理 1、 峰位重排产生的原因： ⑴、 流动相中换了强溶剂，如甲醇改成乙晴 ⑵、 PH值改变 ⑶、 柱温改变 ⑷、 柱填料的改变 ⑸、 流动相组成改变（如加入离子对试剂） ⑹、 离子强度的改变。 2、 毛刺产生的原因 ⑴、 流动相中有气泡。 ⑵、 进样器内有残留。 ⑶、 检测器接地不好。 七、 一般的操作顺序： 1、 先要充分过滤流动相，再配好所需流动相，然后用超声波脱气。 2、 打开泵 3、 换流动相，换时要先打开放空阀，到流出差不多10ML时就可以了，也可以看一下流流动相的管中还有没有气泡。最后关上排空键，关上放空阀。 4、 泵运行一段时间后打开检测器设定好波长，也可以同时打开。 5、 打开电脑和工作站 6、 当工作站基线走直时就可以进样。 7、 每一天做完样品后，都要清洗泵头和进样器。 每一段时间要定期清洗检测器。 HPLC常见问题和解决方法总汇 压 力 异 常 操作压力的变化往往是故障的征兆。从下表中找出所观察到的现象，并在右侧的列表中参考相应的解决方法。 A、??????? 没有压力显示，没有流动相流动 原 因 解决方法 1、电源问题 1、接通电源，开机 2、保险丝被烧坏 2、更换保险丝 3、控制器设定不正确或设定失败 3、a、采取恰当的设定 b、修理或更换控制器 4、柱塞杆折断 4、更换柱塞杆 5、泵头内有空气 5、溶剂脱气、启动泵抽出空气 6、流动相不足 6、a、补充流动相 b、更换入口滤头 7、单向阀损坏 7、更换单向阀 8、漏液 8、拧紧或更换手紧接头 B、???????? 流动相流动正常，但没有压力显示 原 因 解决方法 1、仪表损坏 1、更换仪表 2、压力传感器损坏 2、更换压力传感器 C、??????? 压力持续偏高 原 因 解决方法 1、流速设定过高 1、调整流速设定 2、柱前筛板堵塞 2、a、在允许情况下反冲色谱柱 b、更换筛板 c、更换色谱柱 3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀 3、a、使用恰当的流动相 b、冲洗色谱柱 4、色谱柱选择不当 4、选择恰当的色谱柱 5、进样阀损坏 5、清洗或更换进样阀 6、柱温过低 6、提高温度 7、控制器失常 7、修理或更换控制器 8、保护柱阻塞 8、清洗或更换保护柱 9、在线过滤器阻塞 9、清洗或更换在线过滤器 D、??????? 压力持续偏低 原 因 解决方法 1、流速设定过低 1、调整流速 2、系统漏液 2、确定漏液位置并维修 3、色谱柱选择不当 3、选择恰当的色谱柱 4、柱温过高 4、降低温度 5、控制器失常 5、维修或更换控制器 E、???????? 压力不断上升 原 因 解决方法 1、见列表C 1、见列表C F、???????? 压力降为零 原 因 解决方法 1、见列表A、B 1、见列表A、B G、??????? 压力不断下降，但不回零 原 因 解决方法 1、见列表D 1、见列表D H、??????? 压力波动 原 因 解决方法 1、泵中有气体 1、a、溶剂脱气 b、从泵中除去气体 2、单向阀损坏 2、更换单向阀 3、泵密封损坏 3、更换泵密封 4、脱气不充分 4、a、溶剂脱气 b、改变脱气方法（使用在线脱气法等） 5、系统漏液 5、确定漏液位置并维修 6、使用梯度洗脱 6、由于流动相粘度的变化引起的压力波动 漏 液 通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏（例如，卡套损坏、密封表面有杂质）；损坏的接头应该更换掉。 A、