三色革裥菌Lenzetis tricolor胞外漆酶纯化及性质研究.pdf

俑蛩 摘要 (班)：淀粉20，牛肉虽白胨2．0，Na2HP04·12t／200．47，KHze04 0．001， 0．5，CaChO．01，MnS044H200．001，FeS04·7H200．001，ZnS04·7H20 50 CuSO(．5H200．001，愈创木酚0．062及VBl 检测了不同培养方式下漆酶活性、菌丝干重、残糖量及pH值变化情况，确定最佳培养 方式为母液和发酵液均为静鬣培养。 浓缩、上DEAE-Sepharose nm吸收值、活力变化二者的关系 回收率为8．6％。分析SephadexG．150层析过程中280 FF离子交换层析 法最终纯化倍数达18．54，活力回收率为37．17％。从EDAE—Sepharose llm吸收恤曲线重叠情况肴，分离此漆 及SephadexG．75分子筛层析过程中活力值与280 酶选择EDAE．SepharoseFF与SephadexG．75两种介质更合理。 对漆酶部分动力学特征进行测定：反应过程曲线表明该漆酶符合酶促反应动力学特 征。粗漆酶最适反应温度为加℃，而纯化漆酶较商为60℃；粗漆酶最近反应pH值为 6．0，纯化漆酶为4．6。金属离予对纯化漆酶活力的影响很大，当金属离子浓度为5 ca“对漆酶有明显的促进作用。所测试浓度下的抑制剂乙二氨四乙酸和乙二氨四乙酸二 钠盐对漆酶有完全的促进作用，乙二氨四乙酸的浓度为10 活力为对照组活力的9．78倍；而硫脲、叠氮化钠和二硫苏糖醇在足够低的浓度下列’漆酶 有一定的促进作用，在较高定浓度下对漆酶完全抑制。该酶氧化丁香醛连氮的米氏常数 Km值为26．62 pmol／L。 关键词三色革裥菌；胞外漆酶；培养条件；纯化；性质测定 Abstract This researchedthecharactersofcrudeextracellularlaccasefromLenzetistricoIn， paper effectsofcarbon atfirst．Wedescribedthe to the resource， orthogonalexperimentstudy substancesandinitialvalueonthe of rCSOUrCC，lignin·like production nitrogen pH of Lenzetistricolor．Thenwevalidatedtheeffectofdifferentconcentrationcarbon lacease by Oillaccase laccase resourceand resource nitfogen activity．Finally,theoptimumproducing medium was(g／L)：starch20，beef 2，Na2HP04‘12H200．47，KH2P040．45，