DSX及其成分对体外培养鼠视网膜神经节细胞影响的实验研究.pdf

摘要 目的：1建立高压体外培养视网膜神经节细胞模型并观察压力对视网膜神 经节细胞的影响；2初步探讨利用体外培养细胞系进行药物成分筛选的顺序； 3观察通瘀开窍中药灯盏细辛提取物(Dsx)及其成分对体外培养视网膜神经 节细胞的影响。 Nerve 方法：1建立大鼠视网膜神经细胞(RetinalCells，RNCs)混合培 养和视网膜神经节细胞(RetinalGanglionCells，RGCs)纯化培养模型。2将装 有RGCs的培养瓶密闭，分别加压至20mnff／g、40mmHg、60mmHg、80mmHg， 加压时间1~4小时后收集细胞，用流式细胞仪(FcM)测定凋亡细胞百分率。 3在混合培养和纯化培养24小时后的神经细胞或RGCs中加入不同浓度的 时，用噻唑兰比色法(MTT法)，测定每组的光密度值(OD值)。4在培养 纯化的RGCs中加入DSX7，并密闭加压至80 mmHg，4小时后收集细胞，用 流式细胞仪测定凋亡细胞百分率。 结果#1RNCs的混合培养最长可存活2～3周，RGCs的纯化培养可存活 时间2—3天。2压力20mmHg、40mmHg、60mmHg、80 mmHg，加压时间 1-4小时均能促进RGCS的凋亡，其凋亡细胞的数目以80 mmHg、4小时为最 的OD值高于空白对照组(Po．05～O，01)。4在RGCs以80 mmHg培养4小时 时，浓度lmg／ml的DSX7组的凋亡百分率低于空白对照组和模型组P0．01)。 结论：1混合培养的RNCs比纯化培养的RGCs存活时间长。2压力能促 DSX7 进RGCs的凋亡，其凋亡细胞的数目随压力的增大、时间的延长而增加。3 是具有RGCs保护作用的最有效成分。4利用体外培养细胞系进行中药有效成 分的逐级筛选是有效而经济的方法之一。 关键词：视网膜神经节细胞 视网膜神经细胞 细胞培养 压力 细胞凋亡 视神经保护 神经生长因子 ABSTRACT culturemodelinvitroofRetinal To cell build PURPOSE：1 highpressure To observetheRGCseffected research Cells(RGCs)and bypressure．2 Ganglion with lineinvitro．3 medicine cell the of ofChinese component sequencescreening for culturedin andDSXl·7RGCs To the andmechanismofDSX studyeffect vitro． to