原创力文档- 1、本文档共46页，可阅读全部内容。
- 2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
查看更多
* * 氯仿：异戊醇：24：1(体积比) 即配即用 每支试管加 500 μl 氯仿： 480 μl 异戊醇： 20 μl * * 核酸的酚抽提 原理：交替使用酚、氯仿两种蛋白质变性剂，更有效去除蛋白质。 氯仿还可加速有机相与水相的分层。 异戊醇：抑制界面泡沫的形成。 标准程序：酚——酚-氯仿——氯仿。 * * 酚抽提除去蛋白质的示意图 * * 四、实验步骤(Experimental Procedures) 等量分装在两支离心管内 加入20ul的RNase 加入等体积①提取液 4℃ 10min 酶解样品 待抽提的样品 抽提 静置 离心 配制 TE缓冲液 加等体积②提取液500ul 10000r／min离心10min 4℃ 10min 移出水相 至离心管 抽提 静置 10000r／min离心10min 加1/10 加2倍 放入 离心 移出水相 NaAc 无水乙醇 -20℃ 1-2h 12000r／min离心15min 加入 超低温冰箱 融化、离心 弃上清液 洗涤 12000r／min离心15min 干燥 4℃ 75%冷乙醇 离心 弃上清液 加TE 50μl 存放 DNA * * 核酸的沉淀 原理：核酸与钠、钾、镁形成的盐在许多有机溶剂中不溶，也不会变性。 醋酸钠为沉淀DNA、RNA的最常用盐类。 有机溶剂：乙醇、异丙醇、聚乙二醇。 温度：冰水 * * 四、实验步骤(Experimental Procedures) 等量分装在两支离心管内 加入20ul的RNase 加入等体积①提取液 4℃ 10min 酶解样品 待抽提的样品 抽提 静置 离心 配制 TE缓冲液 加等体积②提取液500ul 10000r／min离心10min 4℃ 10min 移出水相 至离心管 抽提 静置 10000r／min离心10min 加1/10 加2倍 放入 离心 移出水相 NaAc 无水乙醇 -20℃ 1-2h 12000r／min离心15min 加入 超低温冰箱 融化、离心 弃上清液 洗涤 12000r／min离心15min 干燥 4℃ 75%冷乙醇 离心 弃上清液 加TE 50μl 存放 DNA * * 四、实验步骤(Experimental Procedures) Agarose Gel Electrophoresis ： Preparation of the gel 制备0.3％琼脂糖凝胶 Loading DNA samples DNA samples 16μ
文档评论（0）