两种改良脱水程序在小白鼠不同组织处理中的应用比较.pdfVIP

·940· 临床与实验病理学杂志JClin Pathol2016 Exp Aug；32(8) 网络出版时间：2016—8一1709：46 两种改良脱水程序在小白鼠不同组织处理中 迈新==二] 的应用比较 技术交流 郑伟1，刘亚军2，陈倩倩3 关键词：脱水程序；组织处理；动物标本；人体标本；小鼠 329．33 中图分类号：R-33；R 文献标志码：B AEC显色，以上抗体购自Abeam公司。免疫组化染色采用 文章编号：11301—7399(2016)08—0940—03增强型(Polink一1)一步法，具体操作步骤按试剂盒(聚合物 doi：10．13315／j．cnki．cjcep．2016．08．025 金桥公司。定量分析使用“ImagePlus”彩色图像分析系统， 人体标本与动物标本的组织处理，以及不同动物脏器的 准确分割阳性区域，测量阳性区域的总面积(area)和单位光 处理程序，已有过一些报道，但说法不一卜“。本文取材小 密度(density)L6J，比较所得数据，探讨A、B程序的差异。 1．3统计学分析应用SPSS 白鼠不同脏器组织，分别用改良的“常规送检标本通用脱水 17．0软件进行统计学分析， 程序”与“小标本脱水程序”处理，并比较这两种程序处理的 对各指标的均数进行比较，采用方差分析检验组间差异。 小白鼠各脏器在常规制片、免疫组化片中的差异，现介绍如 2结果 下。 小白鼠各脏器组织常规HE片、免疫组化片，A、B处理 1材料与方法 程序比较HE片3项评价指标，免疫组化两项定量指标，差 1．1材料收集福建医科大学及福州大学实验动物中心小 异均无显著性(P0．05，表1、2)。小白鼠肺、心、肝、肾、脾、 白鼠肺、心、肝、。肾、脾、胰、脑组织，各15例。 胰、脑组织HE片，可见各组织切片完整、染色清晰、核质分 1．2方法 1．2．1组织前期处理各组织均经10％中性福尔马林及 9)免疫组化片，阳性表达定位清晰。 时固定。修切的组织块大小一般不超过1．5em×1．5cm× 3讨论 0．3cm，每个脏器组织各取材2块。半封闭式自动组织脱水 机(徕卡TPl020)分别用“常规送检标本通用脱水程序”与 组织处理的目的是去除组织中所有可萃取的水分，并以 “小标本脱水程序”‘5 o处理组织块，但经过改良(脱水从70％ 一种起承托作用的介质取代。目前工作中，脱水试剂常用乙 乙醇开始各增加一道程序)，具体步骤如下(下文称A、B程 醇，脱水采取不同浓度梯度的乙醇进行。透明剂用二甲苯， 序)。A程序：(1)10％中性福尔马林固定2h。(2)70％乙 其能把组织内的脱水剂转换出来。浸润使用石蜡，组织内的 醇2h，80％乙醇2h，95％乙醇I、Ⅱ各1．5h，无水乙醇I、 透明剂可被熔化的石蜡置换出来，整块组织为石蜡分子浸透 Ⅱ、Ⅲ各1h。(3)二甲苯I、Ⅱ各30min。(4)56—58℃石 和充填。最后，用模具把组织包埋起来，凝固后组织蜡块借 蜡I、Ⅱ、Ⅲ各1h。B程序：(1)10％中性福尔马林固定1h。 切片机切成菲薄的切片口1。 (2)70％乙醇90min，80％乙醇30min，95％乙醇I、Ⅱ各20 王凤琴等…认为，各器官脱水、透明、浸蜡的适宜时间是 rnin，无水乙醇I、Ⅱ、Ⅲ各15min。(3)二